核心结合因子α1（Core binding factor α1，Cbfa1）也称为Runx2，是调节成骨细胞和骨发育的关键因子，Runx2–/–小鼠完全缺少骨化，Runx2+/–小鼠骨发育明显受到抑制，其骨发育缺陷表型与人类疾病锁骨颅骨发育不良综合症（Cleidocranial dysplasia，CCD）相似，部分CCD患者可检测到Runx2基因的突变。核心结合因子β（Cbfb）与Cbfa形成二聚体，稳定Cbfa与DNA的结合，增强Cbfa的转录调控活性，共同调节骨骼系统的发育。Cbfb–/–小鼠因Runx1功能缺陷引起肝脏造血障碍于胚胎期即死亡，Cbfb–/–Tg和CbfbGFP/GFP小鼠纠正了肝脏造血功能障碍，可以存活至出生前，表现出骨骼系统发育缺陷，其表型与Runx2+/–小鼠相似，具有CCD的典型表现。一些CCD病人可检测到Cbfb基因的突变，而Runx2的表达正常，说明Cbfb突变也是引起CCD的一个重要原因。这些基因突变小鼠都因骨骼发育缺陷严重而导致呼吸困难在出生后死亡，无法研究Cbfb在出生后骨骼发育中的作用和机制，以及Cbfb基因突变小鼠成年后的骨骼发育缺陷情况。研究Cbfb在出生后骨骼发育中的作用机制、Cbfb基因突变小鼠成年后骨骼发育的缺陷，可以为诊断及治疗CCD提供新的思路。【目的】利用Cre/LoxP系统分别在间充质细胞和软骨细胞内特异性敲除Cbfb，以避免Cbfb敲除导致的转基因小鼠出生后死亡，建立新的CCD小鼠模型；研究Cbfb在出生后骨发育中的作用，观察Cbfb敲除小鼠成年后骨骼系统发育障碍，进一步探讨Cbfb突变对骨和软骨发育的影响以及Cbfb在CCD发生中的作用。【方法】将Cbfb等位基因两端插入LoxP片段的转基因小鼠分别与Prx1和Col2a1启动子驱动Cre重组酶表达的小鼠交配，来建立间充质细胞和软骨细胞内特异性Cbfb敲除小鼠模型，通过对小鼠整体骨架染色、组织形态学、免疫学分析，观察不同发育时期转基因小鼠骨骼系统发育缺陷，研究Cbfb敲除对成骨细胞和软骨细胞分化成熟的影响，探讨Cbfb调控软骨细胞分化的分子机制；体外培养Cbfb敲除间充质细胞进行成骨诱导性培养，检测Cbfb敲除对成骨细胞分化和功能的影响。【结果】Cbfbf/fPrx1-Cre小鼠出生后能够成活并生长至成熟，骨发育障碍明显，表现出CCD的特征性表现：颅骨钙化受到明显抑制，锁骨细小，四肢短小随着发育进展愈加显著。Cbfbf/fPrx1-Cre小鼠软骨内成骨延缓，软骨细胞增殖和成熟受到抑制，组织学分析和免疫荧光检测显示软骨细胞内Ihh、Cyclin D1、ColX表达降低，PTHrP-R表达升高；成骨细胞功能受到影响，骨桥蛋白和骨钙素的表达降低，骨松质的形成障碍。敲除Cbfb的间充质细胞向成骨细胞分化同样受阻，且成骨细胞功能低下。Cbfbf/fCol2a1-Cre小鼠在出生后同样能存活下来，而且表现出明显的软骨内成骨受限，软骨细胞的增殖和成熟延缓，膜内成骨正常。【结论】间充质细胞和软骨细胞内特异性Cbfb敲除小鼠能够存活，Cbfb在成骨细胞的功能调节中具有很重要的作用，并且可以影响Ihh、Cyclin D1和PTHrP-R的表达，进而调控软骨细胞的增殖和成熟，Cbfb基因突变是CCD发病的重要原因之一。