论文部分内容阅读
本文以玉米蛋白粉为原料,研究了叶黄素的高效液相(HPLC)定量方法、优化了玉米蛋白粉中叶黄素的提取及皂化工艺参数,并利用高速逆流色谱进行了叶黄素纯化的初步研究。得到具体结论如下:
(1)以乙腈和乙酸乙酯组成的流动相系统进行梯度洗脱,在填充料颗粒直径为5μm的分析型Ci8硅胶柱上较好的实现了叶黄素和其他类胡萝卜素的分离,紫外检测波长为447nm,柱温26℃。利用外标法制作标准曲线,当叶黄素质量浓度为13.92~174.00μg/mL时,有回归方程Y=0.0622X-0.0294,R2=0.9995。该方法精密度为0.68%,平均回收率为97.61%。
(2)通过单因素和正交试验,确定了优化的叶黄素提取工艺参数为:提取溶剂95%(质量分数)的乙醇,液固比5mL/g,提取时间0.5h,提取温度25℃,该工艺1次和2次提取的粗提取率分别为67.63%和69.68%;对试验选取的玉米蛋白粉,皂化能显著提高叶黄素质量浓度,提高率为37.74%,优化的皂化工艺为:温度25℃,时间3h,KOH浓度5%(m/v),该工艺的叶黄素得率为45.67%(1次提取)。
(3)利用HPLC方法对叶黄素在3种溶剂系统中的分配系数进行测定,并选择正己烷/乙醇/水(6∶5∶1.3)为叶黄素纯化的溶剂系统;在流动相流速为1.2mL/min,转速为800r/min的条件下进行高速逆流色谱(HSCCC)纯化,收集产物经HPLC检测,叶黄素纯度最高可达91.57%,因此HSCCC是一种分离制备高纯度叶黄素的有效方法。