非小细胞肺癌ERCC1的检测及表达与顺铂耐药的相关性研究

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目的:探讨非小细胞肺癌(Non-small cell lung carcinoma-NSCLC)肿瘤组织制成不同标本状态检测切除修复交叉互补基因1 (excision repair cross completion gene 1, ERCC1)蛋白表达的差异及ERCC1蛋白表达与顺铂耐药的关系,为指导检测ERCC1标本状态的选择及顺铂应用于非小细胞肺癌的个体化治疗提供理论依据。方法:1、收集60例NSCLC病人手术切除的新鲜肿瘤组织标本,并制成3份,分别用于体外药敏试验及ERCC1蛋白的检测。2、其中1份新鲜肿瘤组织即刻以CCK-8(Cell Counting Kit-8)药敏试验法进行顺铂体外药敏试验。3、另外两份新鲜肿瘤组织被制成新鲜冰冻切片及石蜡包埋切片,采用MaxvisionTM快捷免疫组化检测法对该两种切片状态进行ERCC1蛋白表达的检测。4、分析比较两种不同标本状态对ERCC1蛋白检测的差异性及其表达与NSCLC顺铂体外药敏之间的关系。统计学方法采用卡方检验、Fisher精确概率分析法。结果:1、60例NSCLC的肿瘤组织中,体外药敏试验表现为顺铂敏感的27例(45%),耐药的33例(55%)。2、60例NSCLC标本中,采用冰冻切片及石蜡切片检测ERCC1蛋白表达,ERCC1阳性表达者分别为18例与32例(30.0% vs 53.3%),以石蜡切片检测的阳性率明显高于以冰冻切片检测结果(P=0.004);其中以石蜡切片检测在显微镜下呈现出更好的阳性强度以及更清洁的背景。3、石蜡切片检测ERCC1蛋白为阳性表达的32例中,顺铂体外敏感9例(28.1%),28例阴性表达中,顺铂体外敏感18例(64.3%),ERCC1蛋白为阴性表达者顺铂体外敏感率明显高于阳性表达者(P=0.009);冰冻切片检测ERCC1蛋白阳性表达的顺铂体外敏感率与阳性表达的体外敏感率之间差异无统计学意义(P>0.05)。4、石蜡切片检测ERCC1蛋白阴性表达的28例中,体外顺铂敏感的为18例,ERCC1阴性表达与体外顺铂敏感的符合率为64.3%;而冰冻切片检测ERCC1蛋白阴性表达的42例中,体外顺铂敏感的为21例,ERCC1阴性表达与体外顺铂敏感的符合率为50.0%,两者差异无统计学意义(P=0.327)。5、石蜡切片检测ERCc1蛋白阳性表达的32例中,体外顺铂耐药的为23例,ERCC1阳性表达与体外顺铂耐药的符合率为71.9%;而冰冻切片检测ERCC1蛋白阳性表达的18例中,体外顺铂耐药的为12例,ERCC1阳性表达与体外顺铂耐药的符合率为66.7%,两者差异无统计学意义(P=0.754)。6、石蜡切片和冰冻切片检测ERCC1蛋白表达均为阳性的15例中,体外顺铂耐药的为11例,ERCC1阳性表达与体外顺铂耐药的符合率为73.3%;石蜡切片和冰冻切片检测ERCC1蛋白表达均为阴性的25例中,体外顺铂敏感的为16例,ERCC1阴性表达与体外顺铂敏感的符合率为64.4%,两者差异有统计学意义(P=0.048)。7、石蜡切片检测ERCC1蛋白为阳性表达而冰冻切片检测为阴性表达的17例中,体外顺铂耐药的为12例,ERCC1阳性表达与体外顺铂耐药的符合率为70.6%;石蜡切片检测ERCC1蛋白为阴性表达而冰冻切片检测为阳性表达的3例中,体外顺铂耐药的为1例,ERCC1阳性表达与体外顺铂耐药的符合率为33.3%。结论:1、体外药敏显示可能有50%以上的NSCLC对顺铂产生耐药;2、在显微镜下,采用石蜡切片检测ERCC1蛋白表达能够呈现出更好的阳性强度以及更清洁的背景,可作为检测NSLCLC组织ERCCl蛋白表达的标准标本状态;3、石蜡切片检测ERCC1蛋白为阴性表达者顺铂体外敏感率明显高于阳性表达者,而冰冻切片检测结果则未显示明显差异;4、石蜡切片检测ERCC1蛋白为阴性与顺铂体外敏感的相符率和检测为阳性与顺铂体外耐药的相符率要高于冰冻切片检测的相符率,差异无统计学意义。5、ERCC1阳性表达与非小细胞肺癌患者对顺铂耐药相关,ERCC1有望成为肺癌患者顺铂化疗疗效的预测因子。
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