【摘 要】
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冬虫夏草是一种珍贵的药物真菌,具有许多药理功能,但天然的冬虫夏草产量十分稀少,因此,人们采用培养冬虫夏草菌丝体来替代天然冬虫夏草。目前,人工虫草菌丝体的生产多以液体
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冬虫夏草是一种珍贵的药物真菌,具有许多药理功能,但天然的冬虫夏草产量十分稀少,因此,人们采用培养冬虫夏草菌丝体来替代天然冬虫夏草。目前,人工虫草菌丝体的生产多以液体深层发酵为主。本论文以农产副产物米糠和豆粕作为固体发酵的培养基,以虫草活性成分β-葡聚糖的产率为发酵指标,对冬虫夏草固体发酵生产饲料添加剂技术进行了研究。液态发酵中实验以虫草菌丝体及胞外多糖的产量为衡量标准,对几种碳源及氮源进行选择,确定了以蔗糖作为碳源,酵母膏作为氮源。通过单因素实验和正交试验,对液体培养基组分浓度进行优化,结果表明:蔗糖20g/L,酵母膏2g/L,磷酸二氢钾1g/L,硫酸镁0.6g/L为较适的培养基条件。通过对发酵条件影响因素:接种量、温度、培养时间和通气量等研究,确定了在蔗糖、酵母膏液体培养基下发酵生产多糖和菌丝体的最佳条件为:接种量7%、温度26℃、培养时间4d和通气流量1L/min。以最优条件培养得到菌丝体及多糖的产量为12.35g/L和25.10g/L。以豆粕和米糠为固态培养基,固体发酵生产冬虫夏草多糖。通过对发酵生产冬虫夏草多糖条件的影响因素:包括培养基组成配比、接种量、温度、培养基相对湿度、空气相对湿度和培养时间的单因素及正交实验优化的研究,初步确定了在豆粕:米糠为1:2(w/w)固体培养基发酵生产冬虫夏草多糖的最佳条件为:接种量25%、温度26℃、培养基含水量为60%、空气相对湿度为60%和培养时间为8d。以最优条件培养得到的1g菌粉中葡聚糖产量为17.03mg。此外,经傅立叶红外光谱分析、薄层色谱及核磁共振分析,可以确定本研究生产的冬虫夏草多糖为β-D葡聚糖。
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