【摘 要】
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背景大隐静脉是冠状动脉旁路移植术(coronary artery bypass grafting,CABG)中应用最多的一种血管移植材料,然而有研究显示CABG术后5年内有20%-50%的患者出现桥静脉再狭窄,术后10年桥静脉再狭窄率超过50%。如何有效地防治CABG术后桥静脉再狭窄是心外科领域丞待解决的一项难题。miR-146a是调控血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle
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背景大隐静脉是冠状动脉旁路移植术(coronary artery bypass grafting,CABG)中应用最多的一种血管移植材料,然而有研究显示CABG术后5年内有20%-50%的患者出现桥静脉再狭窄,术后10年桥静脉再狭窄率超过50%。如何有效地防治CABG术后桥静脉再狭窄是心外科领域丞待解决的一项难题。miR-146a是调控血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)增殖的重要因子,此外有研究表明,miR-146a参与调控血管球囊损伤术后内膜增生。目的本课题拟通过构建大鼠静脉移植动物模型,明确miR-146a是否参与大鼠静脉移植术后桥血管内膜增生的发生与发展;此外应用miRNA Sponge技术构建miR-146a-Sponge并验证其是否能够有效抑制静脉移植术后桥血管内膜增生的形成。方法构建大鼠静脉移植动物模型,应用qRT-PCR检测移植术后不同时间组桥静脉中miR-146a的表达情况。应用miRNA Sponge技术构建miR-146a沉默腺病毒表达载体并转染VSMC,通过细胞计数、CCK-8以及BrdU实验检测miR-146a-Sponge对VSMC增殖的影响,应用细胞划痕实验检测miR-146a-Sponge对VSMC迁移的影响。应用20%poloxamer F127-0.25%胰蛋白酶-miR-146a-Sponge混合凝胶局部转染移植静脉,检测miR-146a-Sponge对移植静脉内膜增生的影响。结果静脉移植术后不同时间组桥静脉中miR-146a的表达均明显升高。miR-146a-Sponge显著抑制VSMC的增殖与迁移,动物实验结果进一步表明miR-146a-Sponge可有效抑制静脉移植术后桥血管内膜增生的形成,KLF4是miR-146a介导调控的潜在靶基因之一。结论miR-146a-Sponge可有效抑制miR-146a的表达并显著抑制移植术后桥静脉新生内膜的形成。该研究为防治CABG术后桥静脉再狭窄提供了新的研究切入点。
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