【摘 要】
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多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是青春期及育龄女性最常见的一种生殖内分泌紊乱性疾病,常伴有雄激素水平异常升高、卵巢多囊性改变、稀发排卵或不排卵等症状,严重威胁女性生殖健康。迄今为止其发病原因不明确,研究证据显示,血清雄激素水平异常升高与雌激素受体α和β(estrogen receptor alpha/beta,ERα/β)表达异常是评定PCOS病症的两
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多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是青春期及育龄女性最常见的一种生殖内分泌紊乱性疾病,常伴有雄激素水平异常升高、卵巢多囊性改变、稀发排卵或不排卵等症状,严重威胁女性生殖健康。迄今为止其发病原因不明确,研究证据显示,血清雄激素水平异常升高与雌激素受体α和β(estrogen receptor alpha/beta,ERα/β)表达异常是评定PCOS病症的两项标志性指标,但两者间的相关性尚少见文献报道。本研究利用改良脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)法诱导PCOS小鼠模型。将DHEA的溶解方式改良,即在油性溶剂里添加95%的乙醇以提高DHEA的溶解率,随后对3周龄昆明白雌性小鼠持续20d皮下注射DHEA诱导PCOS小鼠模型,前期本课题组通过多种技术检测结果显示该模型构建成功,但缺乏分子层面的鉴定。本研究采用“阴道脱落细胞涂片法”检测模型小鼠性周期的变化;采用免疫印迹技术检测正常与PCOS小鼠颗粒细胞中ERα与ERβ蛋白表达差异;采用酶联免疫吸附技术检测PCOS小鼠模型构建过程中睾酮浓度的变化趋势;最后在健康小鼠颗粒细胞培养体系中添加生理与病理两种睾酮浓度,检测其对培养细胞ERα与ERβ表达的影响。结果显示:改良DHEA诱导法建立的模型小鼠显示典型PCOS性周期发育特征;建模过程中睾酮浓度持续显著升高,建模20d睾酮浓度高于正常生理水平的90倍以上,与PCOS典型症状相同;以正常小鼠卵巢颗粒细胞为对照,模型小鼠颗粒细胞ERα表达与ERα/ERβ比值均显著升高(P<0.05);小鼠卵巢颗粒细胞体外培养体系中添加高浓度睾酮后,ERα表达与ERα/ERβ比值均显著升高(P<0.05)。综上,本研究利用改良的DHEA诱导法成功构建了具有典型ERα与ERβ蛋白表达特征的PCOS小鼠模型,且建模完成后PCOS小鼠血清睾酮浓度能够将体外培养健康小鼠颗粒细胞成功诱导为PCOS样细胞。
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