【摘 要】
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本文利用层层组装方法借助戊二醛交联作用,制备了一系列单组分和双组分的蛋白微胶囊,并探讨了其在仿生组装和药物传递方面的潜在应用。
首先,组装了血红蛋白微胶囊,并将它与
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本文利用层层组装方法借助戊二醛交联作用,制备了一系列单组分和双组分的蛋白微胶囊,并探讨了其在仿生组装和药物传递方面的潜在应用。
首先,组装了血红蛋白微胶囊,并将它与含ATP合酶的脂蛋白体相混合,将ATP合酶组装到胶囊表面。利用葡萄糖氧化酶对葡萄糖的催化作用生成葡萄糖酸,由此产生的质子梯度为ATP合酶的旋转催化提供驱动力。结果表明,ATP合酶催化合成了ATP,且部分地存在胶囊内,这证明重组后的ATP合酶保留了其催化活性,并且也证明作者提出的上述产生质子梯度的方法是行之有效的。所以,通过在微胶囊表面组装脂蛋白体,构建了一种新的仿生膜模拟体系,在细胞外人造环境中呈现了AIP的生物合成过程,并且胶囊还可作为ATP的存储载体。
其次,制备了血红蛋白和葡萄糖氧化酶组成的双蛋白胶囊,利用葡萄糖氧化酶对葡萄糖的催化作用,得到具有葡萄糖响应性质的微胶囊。这种双蛋白胶囊的优势在于两种酶的耦合有利于更大程度地发挥酶活性,进而提高敏感度。血红蛋白具有过氧化物酶催化特性,可以催化过氧化氢对其它底物(醇、酚、醛等)的氧化,本文中,过氧化氢在血红蛋白的催化下将外加的底物Amplex red氧化为一种荧光染料resorufin。通过resorufin的产生能够实时观察到葡萄糖的消耗,借此可以期待开发荧光传感器用于定性检测葡萄糖。同时发现葡萄糖反应过后,胶囊的囊壁通透性发生了变化,原本不可透过的大分子(2000 kDa)也变得自由通透。因此,在作为葡萄糖的传感器以及用作葡萄糖响应的药物载体方面,这种体系具有潜在的应用前景。
最后,基于上述的葡萄糖响应性能,设计并制备了一种胰岛素的可控释放体系。在胰岛素粒子表面,层层沉积过氧化氢酶和葡萄糖氧化酶,形成包埋胰岛素的蛋白多层结构,利用过氧化氢酶与葡萄糖氧化酶之间的耦联反应提高对葡萄糖的响应性能。将被(CAT/GOD)s包覆的胰岛素粒子分散到葡萄糖溶液中,监测胰岛素的释放情况,发现随着反应时间的加长,胰岛素的释放明显加快加大,初步实现了葡萄糖刺激下的胰岛素的释放。作者期待该体系能为糖尿病的治疗提供研究和应用基础。
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