本工作的主要内容是进行流动注射化学发光分析法以及微透析采样技术在药物分析中的应用研究。全文由两部分组成。 第一部分是药物的流动注射化学发光分析研究，共四章。第一章是综述，结合几种常用的化学发光反应体系，评述了1990年以来，特别是1998年后国内外药物化学发光分析方面的应用研究进展，并对8种常见类型的药物化学发光分析的应用研究情况作了简要的概括。 第二章研究了扑热息痛的流动注射化学发光分析方法。研究发现在碱性条件下，扑热息痛对鲁米诺-铁氰化钾体系发光反应具有强烈的抑制作用，据此建立了流动注射化学发光测定痕量扑热息痛的新方法。扑热息痛浓度在4.0×10^-8～1.0×10^-6g／mL范围内与发光强度呈良好的线性关系；检测限（3σ）为2.4×10^-9g／mL。相对标准偏差为2.3％(C=8.0×10^-7g／mL，n=11)。方法用于片剂中扑热息痛含量测定，结果与标准方法测得值一致。同时研究了四种苯酚对位取代物对鲁米诺-铁氰化钾发光体系的影响，并探讨了鲁米诺-铁氰化钾-扑热息痛化学发光反应的可能的机理。 第三章研究了甲硝唑的流动注射化学发光分析方法。铁氰化钾与碱性鲁米诺溶液混合产生化学发光，甲硝唑对该体系有显著的增强作用（亚铁氰化钾存在时）。基于此，建立了流动注射化学发光测定甲硝唑的新方法。甲硝唑浓度在2.0×10^-6～04.0×10^-4mol／L范围内与发光强度呈良好的线性关系；检测限（3σ）为1.5×10^-7mol／L。对1.0×10^-5g／mL的甲硝唑进行11次平行测定得方法的相对标准偏差（RSD）为3.6％。方法用于制剂中甲硝唑含量测定，结果与标准方法测得值一致。对甲硝唑片剂和注射液进行加标回收实验，得方法的回收率分别为101.6％，99.9％。 第四章研究了甲巯咪唑的流动注射化学发光分析方法。研究发现，在酸性条件下，高锰酸钾氧化甲巯咪唑产生弱的化学发光，甲醛的加入可增敏此化学发光反应，由此建立了一种测定甲巯咪唑的流动注射化学发光分析方法。甲巯咪唑浓度在2.0×10^-8～8.0×10^-6g／mL范围内与发光强度呈良好的线性关系。方法的检测限（3σ）为1.8×10^-9g／mL，相对标准偏差为2.7％(C=1.0×10^-7g／mL，n=11)，加标回收率为98.5％。该法用于药片中甲巯咪唑含量的测定，结果令人满意。 摘 要 第二部分是研究微透析－流动注射－光学检测联用系统用于药物分析及临床上重要的主化物质的活体在线分析，主要包括五章。第一章简要叙述了微透析采样的原理，优点和不足，微透析实验及仪器，根据微透析采样的特点分析了选择分析方法时应当考虑的问题，讨论了几种主要的微透析探针校正方法，最后简单地总结了 1990年以来微透析技术的研究进展。 第二章是微透析－流动注射－化学发光联用系统在药物与蛋白相互作用研究中的应用，测定了甲硝哗与人血清白蛋白（HSA）的相互作用参数。详细研究了灌流速度和环境温度对探针透析率的影响，结果表明，探针透析率随灌流速率的增大而降低，随温度的升高而升高。本实验选择灌流速率为spL／min，环境温度为37C，在此条件下，微透析探针对甲硝哇的透析率为25二％。利用Scatchard方程及KIOtZ方程得到了甲硝哩与HSA的键合参数，两种方法获得的甲硝哗与HSA的结合常数（K）和结合位点数（n）一致，分另为 1．50 XIO‘（mol／L）－l和 l．89，键合分数为20石％，与文献值相吻合，说明简单、快速的微透析－流动注射－化学发光联用系统适用于药物与蛋白相互作用的研究。 第三章是关于微透析－流动注射－荧光联用系统在活体在线分析中的应用，对家兔血液中的扩散钙离子进行了在线监测。实验中将微透析探针植入兔子静脉血管中采样，并首次将普通的荧光检测技术应用于活体在线分析。采用了Cd“(／”体系测定钙离子，方法灵敏度高、选择性好，血清中存在的物质在其正常含量范围内不干扰钙离于的测定，检测限（3）为0刀…g／mL。本实验在监测过程中，采用流动注射分析系统在进行样品检测的同时，在线校正检测系统的灵敏度变化的方法，以提高分析系统的可靠性。活体实验中使用的灌流液为Rin驴r试剂。详细研究了各因素对体系荧光强度的影响，以及灌流速度和环境温度对探针体外透析率的影响。实验中采用零通量法对微透析探针进行体外和体内校正，用此法对三个己知浓度即 30，40和 50pg／mL的钙离于标准溶液在37℃下进行体外校正，得到的浓度分别为 32＊土1．5、42＊土2＊干 49．5土0．gpg／mL（平均值上 RSD，n—3），透析率分别为 34刀上 1．3％，31石土 2二％，33．2士 3石％（n二3），并用单尾方差分析对体外透析率数据进行统计检验，所有计算的尸值均小于临界值0．5，说明在不同浓度下测得的透析率之间无明显差异，表明透析率与浓度无关。将零通量法用于活体校正时得到的扩散钙离子浓度为32．5士3．Zpg／mL（平均值士RSD，n—3），活体透析率为刀．5士3二％（n—3），可以看出，活体透析率与体外透析率几乎相等。以上实验结果表明，本文提出的方