A-NK细胞培养与活化条件的改进

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目的:多方面比较无血清培养基AIMV与完全培养基对体外细胞因子激活的A-NK细胞的支持作用.同时探讨IL-12对于A-NK/IL-2治疗的辅助作用.方法:分别用AIMV及完全培养基培养IL-2单独激活或IL-2/IL-12联合激活的粘附NK细胞(A-NK)和非粘附NK细胞(NA-NK),比较在不同培养条件下细胞的增殖能力、杀伤肿瘤细胞的能力、表达粘附分子CD11<,c>和CD25的能力.通过扫描和透射电镜对A-NK细胞杀伤的肿瘤细胞进行形态学观察.结果:与完全培养基培养细胞相比,AIMV培养细胞增殖能力、杀伤肿瘤细胞的能力、表达粘附分子的能力与之相当;在同一培养条件下A-NK细胞的增殖能力、杀伤活性及表达粘附分子的能力明显强于NA-NK细胞;与单独大剂量IL-2(6000IU/ml)激活的A-NK细胞相比,IL-2(1000IU/ml)联合IL-12(5ng/ml)激活的A-NK细胞的增殖能力和杀伤活性与之相当;被A-NK细胞杀伤的肿瘤细胞死亡形式是溶解坏死和凋亡.结论:无血清培养基可替代完全培养基用于A-NK细胞的培养,而A-NK细胞用于治疗肿瘤的过继免疫法要优于NA-NK细胞.联合应用IL-12激活A-NK细胞可降低IL-2的使用剂量,从而避免IL-2带来的副作用.该研究为A-NK的进一步研究和临床的应用推广奠定了理论基础.
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