背景和目的代谢综合征(Met S)是一组以腹型肥胖、高血压、高脂血症、胰岛素抵抗等多种危险因素集合的临床代谢异常综合症。脂质代谢异常导致的胰岛素抵抗是Met S发病的中心环节。脂质代谢包括脂质合成和分解,其中脂质合成与脂肪细胞分化进程有关。Met S引起的脂质代谢紊乱会导致人源脂肪干细胞(h ADSCs)脂质分化功能受损。近年来研究表明环状RNA(circ RNAs)的表达失调与人类代谢性疾病的发生密切相关。本研究旨在探究人源环状RNA circ H19(hsa＿circ H19)在Met S患者血清中的表达和对脂质代谢的影响,并在h ADSCs中探讨hsa＿circ H19对脂质分化的作用与机制。研究方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)探讨Met S患者(n=50)以及非代谢综合征(non-Met S)人群(n=50)血清中hsa＿circ H19的表达水平。采用Spearman相关分析进行hsa＿circ H19与代谢参数之间的双变量分析。构建多因素回归模型分析hsa＿circ H19对Met S发病的影响。随后,为了进一步研究hsa＿circ H19与脂质分化之间的相互关系,我们选取h ADSCs进行体外实验。采用引物特异性扩增以及Rnase R实验等方法对hsa＿circ H19的成环进行了验证。运用si RNA转染技术在h ADSCs内敲低hsa＿circ H19后,利用q RT-PCR和Western Blotting实验检测了一系列代表性的脂质分化相关基因的转录和表达,包括过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂蛋白脂酶(LPL)、固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)等。运用蛋白核质分离实验进一步检测细胞核以及细胞质中SREBP1蛋白的变化。随后通过油红染色,尼罗红染色以及甘油三酯摄取实验等定性定量分析了h ADSCs脂质分化能力。之后,采用生物信息学分析、RNA下拉实验以及RNA结合蛋白免疫沉淀实验筛选得到与hsa＿circ H19结合的RNA结合蛋白。应用免疫荧光实验检测SREBP1蛋白的胞核胞浆的定位分布以及核内外转运情况。最后,利用功能回复实验观察hsa＿circ H19在RNA结合蛋白存在的条件下调控SREBP1蛋白胞核胞浆转运过程中的作用。研究结果与non-Met S人群相比较,hsa＿circ H19在Met S患者血清中高表达(p<0.001)。相关性分析表明hsa＿circ H19与脂质代谢相关因素如身体质量指数(BMI)、腰围(WC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、腰臀比(WHR)、甘油三酯(TG)和内脏脂肪面积(VFA)相关(p<0.05)。多因素回归分析显示,hsa＿circ H19为Met S的独立危险因素(OR=1.340,95%CI:1.008-1.782,p=0.044)。细胞水平的研究结果显示,成功转染si RNA敲低hsa＿circ H19后,PPARγ、C/EBPα、LPL、SREBP1等h ADSCs成脂分化相关基因转录和表达显著上调(p<0.001)。蛋白核质分离实验显示细胞核中n SREBP1蛋白增加,而细胞质中SREBP1蛋白减少。油红染色、尼罗红染色和甘油三酯检测实验证实敲低hsa＿circ H19促进h ADSCs成脂分化。生物信息学分析表明hsa＿circ H19与多聚嘧啶序列结合蛋白1(PTBP1)有多个结合位点。随之进行的RNA下拉实验以及RNA结合蛋白免疫沉淀实验都证明了两者的相互结合。免疫荧光实验和功能回复实验结果显示敲低hsa＿circ H19后在PTBP1存在的条件下可激活SREBP1的核内转位。研究结论临床研究表明hsa＿circ H19在Met S患者血清中表达增高,是Met S的独立危险因素,且其表达水平与WC、VFA等脂质代谢相关因素呈正相关。体外实验表明敲低hsa＿circ H19促进h ADSCs成脂分化,潜在的作用机制可能与hsa＿circ H19的下调解除了对PTBP1的结合抑制作用,激活SREBP1的核内转位,从而促进了下游脂质分化相关基因的表达。