近江牡蛎糖原提取、纯化及化学结构研究

来源 :广东海洋大学 | 被引量 : 15次 | 上传用户:ylhly200
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
牡蛎(Oyster),俗称蚝、海蛎子、蛎黄,属牡蛎科,双壳类软体动物,是我国重要海洋贝类,其分布广泛,资源丰富。牡蛎肉肥味美,营养丰富,富含蛋白质、糖原、氨基酸、维生素及微量元素。研究表明,牡蛎糖原具有解酒保肝、抗癌等生理活性,但其化学结构尚不清楚。本论文以近江牡蛎为原料,对牡蛎糖原进行提取制备,分离纯化,并对纯化的牡蛎糖原组分进行化学结构分析,为牡蛎糖原构效关系的研究提供理论依据。主要研究的内容及结果如下:1.牡蛎糖原提取工艺优化采用水提法、碱提法和酶提法分别提取牡蛎糖原,试验结果表明,碱提法的提取率最高(90.14%)。对碱提法进行了工艺优化。选择KOH浓度、提取温度、提取时间三个因素分别进行单因素试验。在单因素试验基础上,进行三因素三水平的正交试验,各因素对牡蛎糖原提取率的影响主次顺序为:温度>KOH浓度>时间,对试验组合进行优化,得到最佳提取条件:KOH浓度30%、温度90℃,时间120min,此时,糖原提取率为92.45%,得率为4.55%。采用Sevag法除蛋白。牡蛎糖原提取液经5次脱蛋白后,蛋白去除率达到91.6%,经紫外扫描,在280nm处无特征吸收峰。综合考虑除蛋白效果和经济性,选择5次作为除蛋白的最佳次数。选用最佳工艺条件提取牡蛎糖原液,经脱色、Sevag法除蛋白、乙醇沉淀、透析和冷冻干燥的方法制得牡蛎糖原粗品OG,其总糖含量为80.72%,蛋白质含量为1.96%,脂肪仅为0.16%。2.牡蛎糖原分离纯化采用DEAE-52纤维素阴离子交换柱层析对牡蛎糖原粗品OG进行分级纯化,依次用蒸馏水,0.1mol/L、0.2mol/L、0.3mol/L、0.4mol/L和0.5mol/L的NaCl溶液洗脱,分别得到OG0、OG1、OG2、OG3、OG4和OG5六个糖组分。再利用Sepharose2B凝胶柱层析对得率较高的OG0、OG1和OG2组分进行分离,得到OG0-1、OG1-1和OG2-1三个组分。采用高效凝胶渗透色谱法证明OG0-1、OG1-1和OG2-1三者均为单一的牡蛎多糖组分。3.牡蛎多糖基本理化性质采用苯酚-硫酸法、Folin-酚法分别对OG0-1、OG1-1、OG2-1中总糖和蛋白质含量进行分析,结果表明,OG0-1、OG1-1和OG2-1的总糖含量分别为94.45%、97.82%、86.68%;蛋白质含量分别为0.61%、0.55%、1.24%。采用气相色谱法对OG0-1、OG1-1和OG2-1进行构成糖分析,结果显示,OG0-1由鼠李糖和甘露糖组成,其摩尔百分比分别为90.05%和8.71%;OG1-1仅由一种单糖葡萄糖组成;OG2-1由四种单糖组成,鼠李糖、岩藻糖、木糖、半乳糖的摩尔百分比分别为57.47%、4.06%、12.11%、22.56%。以T系列标准葡聚糖作为分子量标准品,采用高效凝胶渗透色谱法测定OG0-1、OG1-1、OG2-1的相对分子质量,结果表明,OG0-1、OG1-1、OG2-1的相对分子质量分别为166万、227万和233万Da。4.牡蛎多糖组分由三个单一的纯化组分组成,OG1-1是糖原。OG0-1和OG2-1可能是以鼠李糖为主链的螺旋藻多糖,这是由于牡蛎进食海藻,在体内蓄积的藻类多糖。5.牡蛎糖原组分OG1-1化学结构分析对牡蛎糖原组分OG1-1进行红外光谱分析,结果显示OG1-1具有多糖类物质的特征吸收。在862cm-1处出现吡喃糖环α型的C-H变角振动吸收峰,说明存在α型糖苷键。经过核磁共振波谱分析,表明OG1-1存在1,4-糖苷键,并进一步证实OG1-1为α型吡喃糖。经甲基化反应和气质联用分析,结果表明,OG1-1主链由(1,4)-葡萄糖构成,存在1-4,6分支和一些末端糖基(1→)。根据峰面积计算它们的摩尔比,约为1:81:12,主链上约有15%的支链。
其他文献
党的十八大以来,以习近平总书记为核心的党中央深化人才发展体制机制改革、向全党全国发出了'聚天下英才而用之'的动员令,中央出台了一系列人才体制机制改革的重要政
乡村教育运动是产生于20世纪20年代的一场社会改良运动。乡村教育立足于乡村生活,以改良农村现状,解决农村实际问题为目的。乡村教育的内容多与乡土紧密结合,所使用的教材多为乡
目前,在全世界碳纤维严重短缺的背景下,玄武岩纤维优良的综合性能与较高的性价比使其在某种程度上可以替代碳纤维,然而要使它在复合材料领域中逐渐显现出更加广阔的应用前景,
本文详细综述了米糠蛋白和植酸的营养功用、目前开发应用情况及工艺提取方法,并对各方法优缺点进行了评价分析,在此基础上改进了传统工艺的提取和纯化方法,设计了新的工艺路线。
龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)是江蓠属(Gracilaria)的一种温带性红藻,原产于我国的山东沿海和日本冲绳岛。龙须菜硫酸酯多糖含量约占藻体干重30%,是一类高活性物质,具有免疫调
中国游泳队副总教练张雄,近几年带出了一批世界好手,如林莉、王晓红等。成功的奥秘何在呢?为此我们对张雄教练进行了专访,请他谈谈林莉、王晓红训练的成功之道。
当前,出版业出现了一个新型的发展模式——“出版+文创”模式。这一模式兼具出版和文创的特征,以传播文化为本质特征。其发展过程中存在不少问题,如发展不均衡、同质化产品太
河南科技学院是省属普通本科院校,国家“2011”计划协同创新单位,目前有在校生49000余人,形成了以本科教育为主体,兼有研究生教育、高职教育、成人高等教育等多层次、多科性的办
吸湿排汗运动裤作为一类高性能运动装备受到运动员和健身爱好者的喜爱,其对运动生理的影响也受到了研究者的广泛关注。据报道,穿着吸湿排汗运动裤能及时吸收运动过程中产生的汗
评定分光光度法测定黑米花青素含量的不确定度。建立相应的数学模型,并对影响模型中各因素的不确定度来源进行分析、计算和评定。结果表明样品测定重复性带来的不确定度和样