限进性固相萃取薄膜卷柱直接处理大鼠血浆样品研究

来源 :广东药科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:yindiantiffany
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众所周知,样品前处理是药品检验与分析的关键步骤。该过程不仅耗占大量时间,还是造成后续分析结果出现偏差的重要原因之一。目前,固相萃取是主流的生理体液样品前处理手段,而多数情况下进行SPE前需要事先除去血样中的蛋白后才能进行萃取操作。限进性固相萃取介质很好的解决了这个问题。它具有双功能基团,其外部亲水基团可以排阻生物大分子(如蛋白质等)并允许小分子目标分析物进入介质内部,而内部功能性基团则与进入介质的目标物发生相互作用并将其保留。这种针对蛋白等生物大分子的“限进”作用,不仅可以实现目标成分的富集,还可以有效降低基质成分的干扰,最终简化样品前处理过程,提高萃取效率。因此,发展便捷的限进固相萃取技术,对体内药物分析而言具有重要实用价值。本论文针对目前这一研究前沿,开展了限进性固相萃取薄膜卷柱的研究。所制备的薄膜卷柱可以很方便地安装在1mL的医用注射器内,通过手动抽吸、排液枝接完成对大鼠血浆样品的处理。本论文研究内容主要包括以下部分:(1)文献综述主要介绍了样品前处理技术的发展现状,着重阐述了近年来固相萃取、膜萃取、限进性材料的研究进展。同时,还总结了电子转移催化剂再生联合原子转移自由基聚合法(activatorsregenerated byelectrontransfer-atom transferradical polymerization,ARGET-ATRP)的应用特点。结合文献调研结果,提出研究思路及构想。最终确定对多孔聚丙烯薄膜进行表面改性,利用ARGET-ATRP聚合法在薄膜表面键合双层功能基团,制备表面限进性固相萃取薄膜卷柱。(2)表面限进性薄膜卷柱的制备及用于直接萃取大鼠血浆中他汀类药物的研究首先,利用聚丙烯薄膜的多孔性(孔径φ15μm),将预聚混合液甲基丙烯酸苄基酯(BZMA)和二甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA)灌入聚丙烯薄膜的孔隙中,再将饱和吸附预聚混合液的聚丙烯薄膜置于两块玻璃板之间压紧,在室温下引发ARGET-ATRP聚合反应制备聚丙烯复合基膜(pol ypropulene-b-(benzyl methacrylate-co-ethylene glycol dimethacrylate),PP-BZMA-EDMA)。然后,以甲基丙烯酸苄基酯(BZMA)和甲基丙烯酸二乙基氨基乙酯(DEAMEMA)为功能单体、EDMA为交联剂,在基膜表面接枝混合作用功能层(poly-(benzyl methacrylate-co-2-diethylaminoeth yl methacrylate-co-EDMA),p-(BZMA-DEAMEMA)),之后进行二次引发枝接亲水功能层(聚甲基丙烯酸羟乙酯,p-HEMA)最终制得具有限进性的混合功能薄膜。该限进性薄膜可以很方便地盘成卷放入1mL一次性医用注射器中组成便捷固相萃取装置。实验中,对薄膜进行了SEM、XPS表征,并基于最佳SPE条件,构建了限进性SPE-HPLC/UV新方法直接萃取、测定大鼠血浆中三种他汀类药物(瑞舒伐他汀钙、普伐他汀、洛伐他汀)。(3)聚丙烯-自组装多巴胺复合薄膜卷柱的制备及其萃取甲氧苄啶的能力考察利用多巴胺在聚丙烯薄膜表面自组装涂覆形成聚多巴胺涂层,制备聚丙烯-聚多巴胺复合薄膜。通过酰基化反应将ATRP引发剂(EBIB)接枝到复合薄膜表面,以甲基丙烯酸苄基脂(BZMA)为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,在复合膜表面接枝疏水性聚合物层(poly(benzyl methacrylate-co-ethylene glycol dimethacrylate),p-(BZMA-EDMA))构建具有疏水性吸附能力的复合薄膜。本研究侧重于聚丙烯-聚多巴胺自组装膜对于目标吸附的可行性。以甲氧苄啶(TMP)为目标物,结合HPLC/UV分析考察所制备薄膜卷柱对TMP的吸附能力。最终结果表明多巴胺复合薄膜卷柱对TMP吸附率达到95.20%。
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