喉癌（Laryngocarcinoma）是头颈恶性肿瘤中最常见的恶性肿瘤之一，由于手术切除治疗会损害喉部，影响生活质量；喉癌细胞对辐射的灵敏度差异性较大,放射治疗效果依旧不佳。脑胶质瘤（Glioma）是最常见的颅内恶性肿瘤，由于其侵润性生长，与脑组织无明显分界，难以彻底手术切除，而放射治疗会对脑功能存在不良影响。黑色素瘤（melanoma），是异常黑色素细胞过度增生引发的常见皮肤肿瘤，早期患者多数可通过手术治愈，但进展期患者中位生存期短、生存率低，且黑色素瘤对放疗不敏感，被认为是一种抗辐射的恶性肿瘤。因此药物治疗已逐渐成为喉癌、脑胶质瘤以及黑色素瘤的重要治疗方法，但是由于目前的化疗药的治疗效果有限，而且存在严重的毒副作用，没有显著提高患者的生存率，所以有必要研究出疗效高、毒性低、乃至天然的抗肿瘤药物对喉癌、脑胶质瘤及黑色素瘤进行治疗。灵芝（Ganoderma lucidum）是一种药用真菌，作为中药材已有数千年的药用历史，据报道，灵芝有免疫调节以及抗肿瘤作用。灵芝中的活性成分之一灵芝免疫调节蛋白（LZ-8）是从赤灵芝中提取的真菌免疫调节蛋白，本论文使用的重组灵芝免疫调节蛋白（Recombinant Ganoderma lucidum immunoregulatoryprotein，rLZ-8）是重新设计编码并全合成LZ-8基因，并通过毕赤酵母表达系统重组表达并纯化获得的蛋白样品，以往研究表明，rLZ-8也具有一定的抗肿瘤活性，例如，rLZ-8可有效杀伤人早幼粒白血病细胞NB4，人肺腺癌细胞A549，人胃癌细胞SGC7901等肿瘤细胞株，但关于rLZ-8对喉癌及脑胶质瘤的治疗作用尚未见报道。本论文是研究是从rLZ-8对肿瘤细胞的体外抑瘤作用和体内抑瘤作用两方面展开的。体外方面采用MTT法检测不同浓度的rLZ-8对Hep-2细胞、C6脑胶质瘤细胞及A375黑色素瘤细胞的杀伤作用。实验结果显示，rLZ-8对以上三种肿瘤细胞都有明显的杀伤作用，其中rLZ-8对Hep-2细胞及A375细胞的杀伤作用呈时间-剂量依赖性，rLZ-8对C6细胞的杀伤作用呈剂量依赖性。通过采用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测rLZ-8对Hep-2细胞、C6细胞及A375细胞的诱导凋亡作用，结果显示，rLZ-8对Hep-2喉癌细胞没有明显诱导凋亡作用，对C6脑胶质瘤细胞诱导凋亡作用显著，且呈剂量依赖性，对A375黑色素瘤细胞有一定的促凋亡作用。体内部分采用皮下接种Hep-2细胞、C6细胞及A375细胞，建立喉癌裸鼠模型、脑胶质瘤裸鼠模型及黑色素瘤裸鼠模型，接种细胞数均为5106个/只。于接种后第二天开始分组给药，给药期间每天测量裸鼠体重，每周测量两次肿瘤体积，给药结束后处死动物，称量肿瘤组织重量。实验结果显示：rLZ-8能降低裸鼠喉癌移植瘤的肿瘤体积及瘤重，但与模型组相比没有显著的抑瘤作用；rLZ-8对脑胶质瘤的治疗作用明显，能显著抑制肿瘤生长，其肿瘤体积和瘤重结果与模型组相比均有显著性差异（P＜0.01）；rLZ-8仅高剂量组对黑色素瘤具有明显的抑瘤作用（P＜0.01）。对剥离出的肿瘤组织进行HE染色，结果显示：rLZ-8能够引起脑胶质瘤及喉癌肿瘤组织的大片坏死，其中脑胶质瘤组织中的坏死区较为明显。以上实验表明，rLZ-8对喉癌抑瘤效果不佳，对脑胶质瘤及黑色素瘤有明显的治疗作用。