【摘 要】
：
目的:预测溶组织内阿米巴14-3-3(Eh14-3-3)蛋白的结构与功能,克隆与鉴定溶组织内阿米巴14-3-3基因,并纯化重组Eh14-3-3蛋白,分析纯化产物的免疫学特性,制备抗重组Eh14-3-3蛋
论文部分内容阅读
目的:预测溶组织内阿米巴14-3-3(Eh14-3-3)蛋白的结构与功能,克隆与鉴定溶组织内阿米巴14-3-3基因,并纯化重组Eh14-3-3蛋白,分析纯化产物的免疫学特性,制备抗重组Eh14-3-3蛋白血清,比较不同内阿米巴属虫株14-3-3蛋白序列,探讨14-3-3蛋白作为研究遗传进化标记分子的可能性。方法:利用生物信息学网站的各种在线工具和Vector NTI Suite软件包对溶组织内阿米巴14-3-3(Eh14-3-3)基因进行分析和功能预测,分别以溶组织内阿米巴HM1∶IMSS株滋养体总RNA逆转录合成的cDNA链和基因组DNA为模板,设计合成引物,PCR扩增Eh14-3-3蛋白编码基因序列,克隆入pET19b载体,并用双酶切法和DNA测序进行鉴定。在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,用树脂层析纯化目的蛋白。SDS-PAGE鉴定,并用ELISA鉴定纯化产物的免疫学特性,检测病人和正常人血清对其的反应性,继而以之免疫小鼠制备抗血清。随后分别扩增各不同内阿米巴虫株滋养体的14-3-3蛋白编码基因序列,并对它们进行了比较分析。结果:溶组织内阿米巴具有三种Eh14-3-3蛋白编码基因的异构体,与GenBank收录(编号分别为EHU13418,EHU13419,EHU13420)的Eh14-3-3蛋白编码基因一致。重组Eh14-3-3蛋白,通过纯化层析,30kD附近得到单一蛋白条带。ELISA等实验证实纯化得到的Eh14-3-3蛋白与慢性反复发作者血清和阿米巴结肠炎病人血清有反应,与包囊携带者血清、急性阿米巴肝脓疡患者血清和正常人血清无明显反应。抗重组Eh14-3-3蛋白血清的与溶组织内阿米巴粗抗原ELISA反应的效价为1∶200,但随后的细胞定位实验为阴性。不同内阿米巴属虫株的14-3-3蛋白序列比较结果提示内阿米巴属14-3-3基因高度保守,生物信息学分析还提示该蛋白是研究物种进化的理想分子。结论:溶组织内阿米巴含有三个14-3-3蛋白的异构体,它们可能在溶组织内阿米巴的成囊过程中发挥重要作用。14-3-3蛋白是研究物种进化有用的靶分子。
其他文献
本文为满足智能手机端居民用电应用需求,面向个人用户的电量使用查询、电量用能分析、用电电费交纳、更名过户和故障报修等业务功能,进行居民用电手机APP设计,实现以月、年为单位的用电量查询及分析功能,用户电费交费功能,产权/户名变更功能,用电故障报修功能等。本文在电力行业移动式手机应用的建设方面具有一定的参考意义和价值。
绝大多数的软件漏洞来源于软件开发阶段,系统开发时期避免漏洞要比运维时期整改漏洞成本低很多。输入输出检验、身份认证、密码管理、错误处理、系统配置、文件管理等各个方面都涉及安全编码,对于每一个具体信息系统的开发,都会面临各种安全隐患和威胁,涉及的理论和技术范围较广,超出一般开发人员的知识储备。面对这种问题,通过对开发中的各个方面的安全隐患进行分析,归纳总结出每一类问题安全预防的有效方法,以方便开发人员
在计算机技术在发展的同时,黑客的攻击性也不断增强,其中云计算技术的出现,方便了人们的工作,提升了企业的管理效率,但与此同时,也出现了相对严重的网络安全技术问题。基于此,本文将重点阐述基于云计算的网络安全技术现状与发展情况。
目前互联网技术已经在人们的生活中得到了普及,为人们的生活带来了便利。通过运用互联网和计算机技术,在生活中可以实现数据的保存、传输和应用,但是在互联网的应用过程中,很多用户因为没有良好的网络安全知识,在使用计算机的过程中出现网络安全问题,造成了相关数据的丢失、损坏和泄漏等严重问题。随着科技的发展,通过数据挖掘技术可以有效的检测网络安全中未知威胁,在人们使用互联网的过程中创造良好的环境。基于此,本文通
大数据平台中每天会产生海量的数据,其中部分数据包含敏感信息。而这些包含敏感信息的数据文件,每天被谁访问了?访问后是否生成了新的数据文件?新文件是否会被继续访问?当前环境下,企业的CISO无法解答这些问题。同时要想阻止敏感信息的泄漏,就必须对敏感数据文件的流向有直观的了解。敏感数据流向分析是为了帮助管理员了解企业内敏感数据的使用情况,分析潜在的泄漏风险。
随着互联网和计算机技术的发展,各行各业包括人们的日常生活都在不断产生数据,数据量成几何倍数增长,单台计算机已无法完成数据处理。为了解决单机无法完成海量数据处理的问题,本文采用Hadoop分布式计算平台来解决这个问题。Hadoop的Spark模型是新兴的数据梳理引擎,Spark可直接在内存中读取弹性分布式数据集的数据,避免了I/O的频繁操作,并大大提高了数据处理速度。