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目的：探讨糖尿病早期大鼠离体胃平滑肌收缩、舒张反应的改变，以及小檗碱对糖尿病大鼠胃平滑肌神经功能的改善和作用机制。方法：体重为200g雄性SD大鼠，分为五组，即正常对照组、糖尿病模型组、模型高剂量灌胃给药组、模型低剂量灌胃给药组和模型腹腔注射给药组。大鼠禁食12h后，腹腔注射1%链脲佐菌素（STZ,65mg·kg-1）溶液诱导大鼠糖尿病模型。模型给药组于腹腔注射STZ并造模成功2周后，高、低剂量灌胃给药组分别灌胃给予200、100mg·kg-1小檗碱；腹腔注射给药组腹腔注射20mg·kg-1小檗碱，每日给药1次，连续2周。采用离体器官肌张力分析方法，以电场刺激及药理学激动剂诱发胃各部位平滑肌收缩、舒张反应，并应用工具药干预神经递质的活动，观察糖尿病早期大鼠离体胃平滑肌功能的损伤，分析神经源性收缩、舒张反应中胆碱能、氮能和嘌呤能神经成分的变化；探讨小檗碱不同给药途径对糖尿病大鼠离体胃平滑肌神经功能的影响，分析可能的作用机制。结果1糖尿病早期大鼠的体征及离体胃平滑肌功能的改变1.1糖尿病大鼠体征、血糖水平及胃的表观变化与同周龄正常大鼠相比，糖尿病大鼠饮水和排尿明显增多，毛色暗哑，尾部变黑。体重明显降低（P<0.01），血糖水平（造模后第3天和第28天）明显升高（P<0.01）。糖尿病大鼠胃组织瘫软、变大，胃底变化尤为明显；胃排空异常，胃内常有内容物残留。1.2大鼠胃体、胃窦平滑肌功能的变化正常及糖尿病大鼠胃体平滑肌电场刺激诱发收缩反应、胃窦自发收缩活动均无显著性差异（P>0.05）。1.3电场刺激诱发大鼠胃底平滑肌收缩反应及机制正常大鼠胃底平滑肌标本，电场刺激（20Hz）诱发可重现且稳定的收缩反应，且收缩反应均能被1μmol·L-1阿托品或0.1μmol·L-1河豚毒素（TTX）完全阻断；糖尿病大鼠胃底平滑肌收缩反应显著小于正常大鼠（P<0.05），且收缩幅度明显紊乱，参差不齐。1.4电场刺激诱发大鼠胃底平滑肌及幽门环形肌舒张反应及机制电场刺激（1~10Hz）正常及糖尿病大鼠胃底平滑肌及幽门环行肌诱发频率依赖性舒张反应，且舒张反应均能被0.1μmol·L-1TTX完全阻断。糖尿病大鼠胃底平滑肌舒张反应显著大于正常大鼠（P<0.01），幽门环行肌舒张反应显著小于正常大鼠（P<0.01）。以0.3μmol·L-1卡巴胆碱预收缩标本，100μmol·L-1L-NAME显著抑制电场刺激诱发的正常和糖尿病大鼠胃底环行肌舒张反应，1Hz时的抑制率分别为94.8%和93.7%，且应用L-NAME后，两组大鼠胃底环行肌舒张反应无显著差异（P>0.05），联合应用α-糜蛋白酶或苏拉明进一步抑制舒张反应，抑制作用强于单独使用L-NAME（P<0.05）。2小檗碱对糖尿病大鼠离体胃底、幽门环行肌功能的影响及机制2.1小檗碱体内、体外给药对电场刺激诱发大鼠胃底环行肌收缩反应的影响及机制高剂量灌胃给药和腹腔注射给药均能纠正糖尿病大鼠电场刺激诱发胃底环行肌收缩幅度的紊乱，并增强收缩反应（P<0.05）；低剂量灌胃给药无明显作用。1,10μmol·L-1小檗碱体外给药浓度依赖性增强电场刺激诱发的正常大鼠（分别增强20.8%和47.7%，P<0.05）和糖尿病大鼠（分别增强54.5%和130.6%，P<0.05）胃底环行肌收缩反应，并能纠正糖尿病大鼠胃底环行肌收缩幅度的紊乱（改善率达100%）。L-NAME单独存在及L-NAME、α-糜蛋白酶和苏拉明共同存在下，正常及糖尿病大鼠胃底环行肌收缩反应显著增强，且纠正了糖尿病大鼠收缩紊乱；并且10μmol·L-1小檗碱进一步明显增强电场刺激诱发的糖尿病大鼠胃底环行肌收缩反应。电场刺激诱发的胃底环行肌收缩反应均能被1μmol·L-1阿托品或0.1μmol·L-1TTX完全阻断（P<0.01）。2.2小檗碱体内、体外给药对电场刺激诱发大鼠胃底环行肌舒张反应的影响及机制高剂量灌胃给药显著改善糖尿病大鼠离体胃底平滑肌舒张反应的过度增强（P<0.01），而低剂量灌胃给药和腹腔注射给药对糖尿病大鼠胃底环行肌舒张反应无明显改善作用。以0.3μmol·L-1卡巴胆碱预收缩标本，10μmol·L-1小檗碱对电场刺激诱发糖尿病大鼠胃底环形肌舒张反应略有改善作用。以0.1μmol·L-1P物质预收缩标本，1,10μmol·L-1小檗碱体外给药对电场刺激诱发正常大鼠胃底环行肌舒张反应无显著影响。以0.3μmol·L-1卡巴胆碱预收缩标本，100μmol·L-1L-NAME显著抑制电场刺激诱发糖尿病模型和高剂量灌胃给药大鼠离体胃底环行肌舒张反应，1Hz时的抑制百分率分别为93.7%和91.6%，应用L-NAME后，两组大鼠胃底环行肌舒张反应无显著差异（P>0.05），联合应用α-糜蛋白酶或苏拉明，舒张反应被进一步抑制（P<0.05）。2.3小檗碱体内、体外给药对电场刺激诱发大鼠幽门环行肌舒张反应的影响小檗碱高剂量灌胃给药和腹腔注射给药均显著增强糖尿病大鼠离体幽门环形肌舒张反应。低剂量灌胃给药无明显效果。1,10μmol·L-1小檗碱体外给药显著抑制正常和糖尿病大鼠幽门环肌舒张反应（P<0.01）。结论1. STZ造模4周的糖尿病大鼠胃平滑肌收缩、舒张反应的变化中，胃各部位敏感性不同，提示糖尿病早期大鼠胃功能改变中，胃底和幽门可能最先发生病变。神经介导的糖尿病大鼠胃底收缩、舒张反应，胆碱能、氮能神经受损；NO和ATP调控所占比例增加。2.小檗碱对糖尿病早期大鼠支配胃平滑肌收缩、舒张反应的胆碱能、氮能神经受损，以及嘌呤能神经递质ATP的改变均有所改善；对胆碱能神经的调节作用显著，且很可能部分依赖于对氮能神经的调节作用。不同给药途径所产生的作用有所不同，很可能涉及小檗碱不同的代谢途径。