富含甘油和有机硒的复合益生菌制剂的制备

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反刍动物直接吸收利用葡萄糖的能力非常有限,且母畜在围产期经历妊娠、分娩、开始泌乳等一系列剧烈的生理变化,极易导致能量代谢障碍。甘油可以作为生糖物质添加到反刍动物的日粮中,能调节血液代谢,提高泌乳性能,增高血糖,降低血液中BHBA和NEFA的含量,降低尿中的酮体含量,进而调节能量平衡。硒是一种动物所必须的微量元素,是一种多功能的生命营养元素,其最主要的功能是抗氧化作用。围产期反刍动物体内活性氧的产生大大超过了正常水平,硒能参与机体的抗氧化防御系统。当前广泛使用的补硒方法是在日粮中添加亚硒酸钠,与有机硒相比,前者结合率低、毒性大、污染大,因此已被限量使用。本试验以特定的益生菌为菌种,以葡萄糖为原料,通过发酵法将原料转化为甘油,并将无机态的硒转变成有机态的硒,制备出用于调控牛羊围产期能量代谢障碍的微生物饲料添加剂,可以同时发挥甘油、有机硒和益生菌三重功效。试验1研究了4种胞内甘油提取的方法及不同培养时间胞内外甘油产量的比较。4种方法为:高氯酸法、盐酸-加热法、蒸馏水-超声法、盐酸-超声法。甘油的检测方法为高碘酸氧化-变色酸法。结果表明蒸馏水-超声法为最佳的胞内甘油提取得方法;胞外甘油产量远远高于胞内。试验2研究了各种培养条件对甘油产量的影响。通过单因子试验和正交试验确定工业化生产富含甘油和有机硒的复合益生菌制剂的最优培养条件。结果表明培养基采用氯化钠高渗培养基、玉米浆干粉添加量为2g·L-1、接种量为6.5%、初始pH为5、温度为33℃、培养时间为120h时甘油产量最高,达60.94g·L-1,添加嗜热链球菌和无机硒均会使甘油产量显著降低。试验表明甘油发酵试验与有机硒转化试验应分开进行。试验3研究了富含甘油和有机硒的复合益生菌制剂的生产工艺及其成品稳定性。在特定培养条件下,比较了用发酵罐和锥形瓶培养克鲁斯假丝酵母对甘油产量、克鲁斯假丝酵母数量的影响;当发酵液用玉米粉吸附制成产品后,每隔1个月对产品中甘油、有机硒的含量和活菌数进行测定,评价保存时间对产品中甘油、有机硒和益生菌量的影响。结果表明:在同等条件下,用发酵罐和普通锥形瓶发酵生产的甘与玉米粉混合、烘干,制备成产品,其甘油含量为82.4g/Kg,有机硒含量约为8.39μg·g-1,3株益生菌的含量分别为9.38x108cfu·g-1、7.69x108cfu·g-1、7.45x109cfu·g-1,一定时间内,甘油和有机硒含量不随保存时间的延长而变化,产品在保存1个月后,酵母菌数量明显下降,3个月后嗜热链球菌的数量出现明显下降。
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