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[目 的]有研究表明,外周神经系统的背根神经节(Dorsal root ganglion,DRG)中存在神经发生的现象,这种现象与感觉神经元周围一类特殊的胶质细胞-卫星胶质细胞(Satellite glial cells,SGCs)有关。前期研究发现SGCs具有可塑性,具有多向分化潜能,条件具备时可转分化为神经元。通过高通量测序筛选的lncRNA表达谱,通过lncRNA Database功能注释结合GO和KEGG富集分析,初步预测lncRNA-Malatl参与调控SGCs的转分化过程,且与proBDNF负调控信息有关。因此本研究探讨lncRNA-Malatl及相关转录因子在调控背根节内卫星胶质细胞的转分化过程中的作用及可能机制。[方法]通过前期高通量测序分析及Q-PCR验证确定与本研究相关的lncRNA后,本研究继续进行DRG-SGCs的培养,通过从新生小鼠中提取背根神经节组织,并继续培养至原代卫星胶质细胞从组织中迁出,然后将所培养的SGCs分为正常组和Anti-proBDNF干预组(干预剂量4ug/ml),在这6个时间点(24h、3d、7d、14d、21d、28d)收集SGCs进行如下实验:Q-PCR、Elisa、细胞免疫荧光、体外lncRNA-Malatl过表达及干扰实验。[结果]1.背根神经节卫星胶质细胞(原代)培养成功。2.通过Anti-proBDNF血清对卫星胶质细胞以及大鼠单侧坐骨神经损伤模型进行干预,Q-PCR验证前期相关靶基因并预测相关转录因子,与测序情况一致。3.通过Elisa试剂盒发现SGCs能够自分泌malat1、proBDNF/BDNF及其受体,并在转分化过程中表达水平发生变化,SGCs中malat1的表达可能影响胶质细胞表型变化,在SGCs转分化过程中malat1表达受到内源性anti-proBDNF分泌影响。4.构建转染实验载体,分别为过表达载体与干扰载体进行预实验,预实验说明试剂盒内的提供的慢病毒滴度与剂量可用于作为实验中的最适值。正式转染实验结果与预实验一致。5.免疫荧光结果鉴定,发现过表达及过表达后通过anti-proBDNF的干预,可以在一定程度上逆转malat1对于细胞促凋亡的作用,使细胞数量在一定程度上恢复;而干扰malat1后,低表达的malat1可能与anti-proBDNF协同调控细胞转分化。6.Q-PCR验证结果显示转染实验前后BDNF信号通路相关因子及其受体及转录因子 AKT1、NKX2.2、CTNNB1、FZD6 存在差异表达。[结论]1.经过lncRNA表达谱分析及生物信息学分析筛选出LncRNA-malat1及其相关的转录因子可能与SGC转分化过程有关,并且可能通过BDNF信号通路发挥作用。2.在正常的背根神经节组织和卫星胶质细胞中存在malat1、BDNF/proBDNF及其受体TrkB/p75NTR,它们的表达水平受到内源性抗proBDNF影响。3.敲低/过表达malat1可能通受到proBNDF/P75NTR和BDNF/TrkB信号调控来影响背根节卫星胶质细胞转分化。