体液microRNa-126在Ⅱ型糖尿病及糖尿病肾损伤中的作用研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yyxu123
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MicroRNA-126(miR-126)是一种特异表达于内皮细胞中的miRNA分子,在维持血管的完整性及功能方面发挥着重要的作用。已有研究报道,Ⅱ型糖尿病患者血浆的miRNAs表达谱中,miR-126水平降低。本研究的目的是评估体液miR-126在Ⅱ型糖尿病及糖尿病肾病患者中的预测作用。在我们的研究中,应用qRT-PCR方法首先分析了miR-126在尿液中的稳定性,结果表明,尿液标本中miR-126的相对水平,在室温孵育不同时间(0、3、6、12h)为5.65(5.40-5.79),5.65(5.41-5.76),5.70(5.34-5.77),5.48(5.28-5.60);不同储存条件(4、-20、-80℃)为5.65(5.40-5.79),5.72(5.55-5.98),5.61(5.33-5.89);不同反复冻融次数(0、2、4、8、10次)分别为5.68(5.41-5.74),5.64(5.58-5.84),5.76(5.58-6.00),5.64(5.54-5.82),5.67(5.56-5.88);不同pH值(4.5、7.0、9.0)分别为5.70(5.60-5.94),5.67(5.44-5.78),5.64(5.44-5.96);不同微量蛋白浓度(0~20、40~80、120~140 mg/L分别为5.73(5.57-5.87),5.64(5.43-5.95),5.81(5.40-5.89)。经单因素方差分析,同因素不同水平下miR-126含量差异均无统计学意义(P值分别为0.161,0.134,0.643,0.635,0.986)。与健康对照组和Ⅱ型糖尿病非糖尿病肾病患者相比,糖尿病肾病患者尿液中miR-126水平显著升高(P=0.002),而Ⅱ型糖尿病非糖尿病肾病患者和糖尿病肾病患者尿液中miR-126水平无显著差异(P=0.324)。尿微量白蛋白水平超过2000 g/L的糖尿病肾病患者,尿液中的miR-126水平与健康人群无显著差异(3.38±0.51 vs3.25±0.45,n=37,P=0.375)。92位糖尿病肾病患者经胰岛素,ACEI/ARB治疗后,80位患者尿液中的微量白蛋白水平降低,同时miR-126水平也显著降低(P<0.05),12位患者治疗后尿液中的miR-126水平未发生显著改变(5.24±0.47)。  应用茎环RT-PCR技术以及qRT-PCR技术直接检测157位IGT/IFG患者,160位新诊断的Ⅱ型糖尿病患者和138位健康志愿者血清中的miR-126水平。结果显示,新诊断的Ⅱ型糖尿病患者血清中miR-126水平显著低于IGT/IFG患者和健康志愿者(P<0.001),与健康人群相比,IGT/IFG患者血清中的miR-126水平显著降低(P<0.001)。IGT/IFG患者和新诊断的Ⅱ型糖尿病患者经适当体育锻炼和降糖治疗后,经配对t检验分析,IGT/IFG和新诊断的Ⅱ型糖尿病患者血清中的miR-126水平均有所升高(P=0.036,P<0.001)。风险比值比(ORs)结果显示,血清中的miR-126水平越低,患糖尿病的风险越高。将健康人群血清中的miR-126水平进行三等分,发现血清中miR-126水平最低的一组患者,糖尿病发生的风险最高(crude OR3.500,95% CI,1.901-6.445,P<0.05)。miR-126作为独立诊断因素时,ROC曲线下面积为0.792(95% CI,0.707-0.877,P<0.001)。当把血清中的miR-126水平加入Ⅱ型糖尿病的传统诊断因素中,其诊断的灵敏度和特异性有所增加,ROC曲线下面积由0.826增加为0.893(0.838-0.947,P<0.05)。  因此,miR-126在尿液中可以稳定存在,体液中的miR-126水平可能成为糖尿病及其并发症诊断和治疗监测中的潜在的预测生物标志物。
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