【摘 要】
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植物病害是农业生产的主要限制因子之一,目前人类解决这一问题的重要途径之一是利用抗性资源,通过常规育种的方法培育抗病新品种。但是由于病原菌变异迅速,植物抗性资源有限,常规
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植物病害是农业生产的主要限制因子之一,目前人类解决这一问题的重要途径之一是利用抗性资源,通过常规育种的方法培育抗病新品种。但是由于病原菌变异迅速,植物抗性资源有限,常规育种方法费时费力,现有抗性资源已经远远不能满足生产的需要。随着分子生物学的迅猛发展,利用基因工程技术将抗病基因导入受体已成为获得抗病植物的重要途径。本试验以美国烟草(Nicotiana tabacum var.Xanthi)的叶盘为受体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法将来自白僵菌的几丁质酶基因Bbchit1、来源于益母草种子的非专一性脂转移蛋白基因LJAMP2所构建的双价基因导入烟草,进行抗病分析。同时利用试验室已经获得的含有来自益母草的核糖体失活蛋白基因LJAMP1,非专一性脂转移蛋白基因LJAMP2的转基因烟草,获得其纯和株系,通过杂交获得同时含有此两种基因的转基因烟草,并分析其抗病性。本试验通过对纯和的转双价基因LJAMP2-Bbchit1烟草,同时含有LJAMP1、LJAMP2的转基因烟草及纯和的转单基因烟草抗病性分析,了解了三种具有不同抗病机理的抗病基因之间的协同抗菌作用,首次报道了非专一性脂转移蛋白nsLTP与核糖体失活蛋白RIP的协同抗菌作用。本试验的主要结果如下:1转化获得转LJAMP2-Bbchit1基因烟草,通过遗传筛选获得转LJAMP1,转LJAMP2,转LJAMP2-Bbchit1双价的纯和转基因烟草,并观察纯和转基因烟草的生长性状,与野生型烟草并无明显差异。2利用获得的LJAMP1、LJAMP2单价纯和转基因烟草,通过杂交获得同时含有LJAMP1、LJAMP2基因烟草。并观察了杂交转基因烟草生长性状,与野生型烟草并无明显差异。3比较分析了纯和的转双价基因LJAMP2-Bbchit1烟草,同时含有LJAMP1、LJAMP2的转基因烟草及纯和的转单基因烟草的抗性强弱,通过比较发现,具有相同亲本的杂交转基因烟草的抗病性无差异,杂交转基因烟草的部分株系抗病性比单价转基因烟草的抗病性有所提高,其中一个株系有显著提高。
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