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目的:研究滤泡辅助性T（follicular helper T,Tfh）细胞及其相关因子在反复种植失败患者中的变化规律,探讨其在反复种植失败中的免疫调节作用和意义。方法:选取胚胎移植失败次数≥3次患者30例为反复种植失败（RIF）组,男方不孕需行胚胎移植且首次胚胎移植成功妊娠的30例健康妇女作为正常对照（Control）组,并收集两组研究对象胚胎移植前一个月黄体中期外周血和子宫内膜组织,并分离血清。1)采用流式细胞术检测外周血中PD-1hiCCR7lowTfh细胞的比率;2)采用CBA检测血清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-6的浓度,ELISA检测血清细胞因子IL-21的浓度;3)采用免疫组织化学法观察两组研究对象子宫内膜组织中CXCR5、IL-21和Bcl-6的定位和分布;4)采用实时荧光定量PCR检测研究对象外周血淋巴细胞中CXCR5、IL-21和Bcl-6 mRNA的表达水平;5)采用Pearson相关性分析方法对Tfh细胞及其相关因子进行关联性分析。结果:1)流式细胞术检测结果显示CD4+T细胞的比例在两组间无显著差异（P>0.05）,两组间Tfh细胞占CD4+T细胞的比例差异无统计学意义（P>0.05）,但RIF组PD-1hiCCR7lowTfh细胞占Tfh细胞的比例显著高于对照组（P<0.05）;2)CBA和ELISA检测结果显示,血清中细胞因子IL-2和IL-4的浓度在RIF和对照组中的差异没有统计学意义（P>0.05）,细胞因子IL-21和IL-6的水平在RIF组显著高于对照组（P<0.05）;3)实时荧光定量PCR检测结果显示,RIF组外周血和子宫内膜中CXCR5、IL-21和Bcl-6 mRNA的表达水平均显著高于对照组（P<0.05）;4)免疫组织化学检测结果显示,两组研究对象子宫内膜组织中的CXCR5、IL-21和Bcl-6均有表达,但在RIF组中的表达水平明显高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）;5)RIF组PD-1hiCCR7lowCD4+Tfh细胞的比例分别与血清中IL-21和IL-6的浓度呈正相关（P<0.05）,分别与外周血中CXCR5、IL-21、Bcl-6 mRNA表达水平正相关,分别与子宫内膜中IL-21和Bcl-6 mRNA的表达水平正相关;外周血中IL-21与Bcl-6 mRNA表达水平正相关;子宫内膜IL-21分别与Bcl-6、CXCR5 mRNA表达水平正相关,Bcl-6与CXCR5 mRNA表达水平正相关。结论:RIF组中增高的PD-1hiCCR7lowTfh细胞可能是诱发反复种植失败的重要原因之一。RIF患者子宫内膜中Tfh细胞相关因子CXCR5、IL-21和Bcl-6在调节胚胎着床的局部免疫环境中也发挥重要作用,其增高不利于胚胎种植结局。目前RIF的诊断中缺乏精确可靠的生物学标准,而免疫因素是其诱发的重要原因之一,探索Tfh细胞及其相关因子在RIF患者体内的变化特点有利于为RIF的诊断和治疗提供新靶点和方向。