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目的：探讨三氧化二砷(arsenic trioxide，As2O3)对HL-60细胞hTERT基因启动子活性的影响，初步揭示三氧化二砷抑制HL-60细胞的端粒酶hTERT表达的分子机制。方法：构建含有hTERT启动子不同片段荧光素酶报告载体，分别转染HL-60细胞，加As2O3作用后检测各组荧光素酶变化；利用生物信息学查找与其潜在的顺式作用元件相作用的转录因子；利用PCR方法验证HL-60细胞表达的生物信息学预测转录因子；利用RT-PCR检测不同浓度As2O3作用HL-60细胞后上述经验证的转录因子mRNA变化。结果：成功构建含有hTERT启动子不同片段荧光素酶报告载体，分别转染HL-60细胞，实验组加入As2O3，测定各组荧光素酶的活性。各实验组与其相应的对照组比较，hTERT启动子phTERT-281/-47和phTERT-1126/-47荧光素酶活性受As2O3作用抑制明显，phTERT-1126/-47比phTERT-793/-47多出phTERT-1126/-794段序列。利用生物信息学技术预测端粒酶hTERT启动子phTERT-281/-47和phTERT-1126/-794段序列上可能结合转录因子Sp1、c-myc、NF-κB、USF2、MZF-2、GATA1、MYOD1和AP2alpha等。采用PCR方法从HL-60细胞中扩增出预测的转录因子Sp1、c-myc、NF-κB、USF2和MZF-2，未能扩增出预测的转录因子GATA1、MYOD1和AP2alpha。运用RT-PCR法检测不同浓度As2O3作用HL-60细胞48h后转录因子NF-κB和USF2在mRNA水平表达下降具有统计学差异(P<0.05)，运用RT-PCR方法检测不同浓度As2O3作用HL-60细胞48h后转录因子MZF-2在mRNA水平表达变化不大(P>0.05)，不具有统计学差异。结论：在As2O3作用下，HL-60细胞hTERT基因启动子上结合的某些转录因子表达变化引起hTERT基因启动子活性下降，从而抑制HL-60细胞的端粒酶hTERT表达，这可能是三氧化二砷(As2O3)治疗急性早幼粒细胞白血病的机制之一。