番茄温敏核不育系及杂交组合花药培养研究

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本论文以番茄温敏核不育系及杂交组合(大107、地D4、大107×牛番茄、地D4x红昆仑)为试验材料进行花药培养研究,主要包括3个方面(1)番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导试验;(2)番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化试验;(3)番茄温敏核不育系花药及愈伤组织的细胞学观察。主要研究结果如下:1番茄温敏核不育系及杂交组合花药愈伤组织诱导试验结果:(1)在2,4-D配合6-BA或KT进行的双因子的激素配组愈伤组织诱导的比较试验中,以2,4-D 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L组合的效果最好,番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导率最高,分别为:大107(35.80%)、大107×牛番茄(25.85%)、地D4(36.65%)、地D4×红昆仑(28.13%)。(2)在2,4-D 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L的基础上,分别与CPPU、TDZ, KT、ZT进行3因子激素组合花药愈伤组织诱导比较试验,以2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT 1.5 mg/L组合效果最好,愈伤组织诱导率分别为:大107(65.07%)、大107×牛番茄(43.10%)、地D4(66.20%)、地D4×红昆仑(46.76%)。(3)4℃不同时间的预处理试验结果表明:亲本以72h为最佳预处理时间,愈伤组织诱导率分别为大10770.70%、地D471.55%,此时花药出愈时间也最早;杂交组合以预处理时间96h时,愈伤组织诱导率达到最大值,分别为大107×牛番茄51.14%、地D4×红昆仑53.71%,此时花药愈伤组织的出愈时间也最早。(4)在3种基本培养基比较试验中,MS培养基对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导效果优于N6、white培养基。花药愈伤组织诱导率分别为大10764.79%、大107×牛番茄43.66%、地D465.63%、地D4×红昆仑47.32%。(5)在不同时间的光照处理中,以全暗处理的番茄花药愈伤组织出愈率最高,且褐化率最低,愈伤组织质地松软,有光泽,生长旺盛,愈伤组织诱导率分别为:大10764.79%、大107×牛番茄43.50%、地D465.54%、地D4×红昆仑47.46%。(6)在相同激素组合的条件下,以MS+2,4-D 1.Omg/L+6-B A 1.0mg/L+KT 1.5mg/L配合蔗糖浓度为35g/L的效果最佳,愈伤组织诱导率分别为大10764.44%、大107×牛番茄43.61%、地D4 66.94%、地D4x红昆仑47.50%。(7)在番茄花药愈伤组织的防褐化试验中,以PVP浓度为1.0g/L时的防褐化效果最好。花药愈伤组织褐化率分别为:大107 23.01%、大107x牛番茄39.20%、地D4 20.74%、地D4x红昆仑37.22%;出愈率分别为:大10773.58%、大107x牛番茄52.29%、地D475.28%、地D4x红昆仑56.57%。(8)在氨基酸的比较试验中,亲本以P2处理(2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L +KT1.5mg/L+Pro500 mg/L+GLy50mg/L)的效果最好,愈伤组织诱导率分别为:大10781.49%、地D4 83.43%;杂交组合以P3处理(2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT 1.5mg/L +Pro500 mg/L+Gly75mg/L)的效果最优,愈伤组织诱导率分别为:大107x牛番茄59.23%、地D4x红昆仑64.74%。2番茄温敏核不育系及杂交组合花药愈伤组织分化试验结果:(1)通过NAA、6-BA、KT、CPPU、TDZ、ZT等激素进行不同组合的愈伤组织分化比较试验,结果表明:在S5 (MS+NAA0.1mg/L+KT1.0mg/L+6-BA2.0mg/L), V3 (MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L+TDZ0.04mg/L)、W4—W5 (MS+NAA0.1mg/L+6-BA 2.0mg/L+ZT (0.6—0.8))mg/L激素组合上番茄温敏核不育系4个品种能分化出芽,分化率分别为:S5(大1072.22%、地D4 4.44%);V3(大1074.44%、大107×牛番茄2.22%、地D4 2.22%);W4--W5(大1076.67%、地D4 4.44%、大107×牛番茄2.22%、地D4×红昆仑2.22%)。(2)椰汁不同浓度的分化比较试验中,以MS+NAAO.1 mg/L+6-BA2.0mg/L+椰汁10%组合分化效果最好,分化率分别为:大1078.89%、大107x牛番茄2.22%、地D46.67%、地D4x红昆仑4.44%。(3)从番茄温敏不育系及杂交组合花药愈伤组织分化中,经芽的形成与生根,获得再生完整植株。3番茄温敏核不育系花药培养途径显微观察在番茄温敏核不育系花药愈伤组织形成途径中,通过石蜡切片,可观察到单核靠边期花粉粒、二胞体、多细胞球等时期,及能见到胚性与非胚性愈伤组织。
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