1．GSAT的克隆，表达和纯化以及初步晶体学分析 5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid，ALA)是四碳合成途径当中首要的供体，植物，藻类和一些细菌也可以通过五碳途径从谷氨酸合成5-氨基酮戊酸。在这个途径中一系列的酶发挥着重要的作用，谷氨酸-1-半醛转氨酶(Glutamate-1-semialdehyde aminotransferase，GSAT)是这个途径的最后一个酶。其他两个重要的酶是谷氨酸-tRNA合成酶和谷氨酸-tRNA还原酶。谷氨酸-1-半醛转氨酶在促使谷氨酸合成5-氨基酮戊酸过程中发挥最重要的作用， 我们从基因组文库中克隆了GSAT的CDS序列，并构建了GSAT-p28a质粒。重组蛋白GSAT-HisTag在E．coli BL21(DE3)中表达量高，用Ni亲和柱纯化后纯度达到95％以上。蛋白质在浓缩和脱盐过程中比较稳定，动态光散射实验证实重组蛋白不存在多聚现象。用悬滴气相扩散法经过筛选和优化得到了GSAT的结晶。X-Ray衍射表明晶体的衍射分辨率可达到2.0(?)。完成了晶体衍射数据的收集，晶体空间群为C2，晶胞参数为a=111.428(?)，b=56.469(?)，c=81.028(?)，β=131.928°。分析计算和自旋patterson函数计算均表明，一个晶体学不对称单位含有一个蛋白质分子。以Synechococcus的GSAT(3GSB)为结构模型，用分子置换法已获得结构的初相位解析。结构模型的精化过程正在进行中。 2．WTAP的克隆，表达，纯化和结构研究 肾细胞肿瘤抑制基因WT1对于泌尿生殖系统的发育有很重要的作用。虽然很多目的蛋白基因已经鉴别和一些WT1结合蛋白已经获得，但是对于WT1的作用机制还是没有研究清楚。我们所研究的蛋白WTAP即肾细胞肿瘤抑制基因WT1相关蛋白，由于其特别的表达方式，因而可能表明其具有一些基本的细胞内功能。由于WTAP是一个细胞核内蛋白，和WT1基因一样通过