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目的探讨转化生长因子β1(transforming growth factor betat1, TGF-β1)及白介素1β(interleukin 1 betat,IL-1β)对人软骨终板组织和体外培养兔终板软骨细胞的作用研究。初步探讨TGF-β1及IL-1β对椎间盘退变的发生、发展中的作用机制,为预防和治疗椎间盘退变的防治提供新思路。方法1.①采用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)方法检测我院2009年11月—2010年6月中病变组取自颈椎病行前路手术切除的椎体软骨终板20例;对照组取自颈椎骨折前路手术治疗所取得椎体软骨终板20例中TGF-β1及IL-1β的表达。②采用蛋白免疫印迹(western blot)方法检测病变组及对照组中TGF-β1及IL-1β的表达。2.采用兔终板软骨细胞原代培养,观察细胞形态,绘制生长曲线,选择2-4代细胞用于实验。在无血清培养液培养的软骨细胞分别加入不同浓度的TGF-β1及IL-1β( 0.5pg/ml、5pg/ml、10pg/ml、50pg/ml),继续分别培养24h后,四甲基偶氮哇盐(4-methyl thiazolyl tetrazolium MTT)比色法测定TGF-β1及IL-1β对细胞增殖的情况。结果1.①免疫组化中病变组TGF-β1及IL-1β的阳性率分别为32.9076%、51.5207%,对照组中TGF-β1及IL-1β的阳性率分别为42.4816%、33.9185%。TGF-β1在对照组总的阳性表达明显高于病变组中的表达,IL-1β在病变组中阳性表达明显高于对照组的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。②蛋白免疫印迹实验中对照组TGF-β1的表达明显高于病变组,病变组IL-1β的表达明显高于对照组。2..MTT法显示TGF-β1实验组浓度为0.5pg/ml、5pg/ml、10pg/ml时,对软骨细胞均有明显的促增殖作用,50pg/ml时对软骨细胞有抑制增殖作用。各实验组与阴性对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05),且作用强度呈浓度依赖性TGF-β1浓度为10pg/ml作用软骨细胞24h时,促增生效果最大(P<0.01); IL-1β实验组浓度为0.5pg/ml、5pg/ml、10pg/ml、50pg/ml时,对软骨细胞均有明显的抑制增殖作用。结论1.人退变终板软骨组织中存在TGF-β1及IL-1β的表达,且病变组中TGF-β1低于对照组,IL-1β的表达高于对照组,TGF-β1及IL-1β阳性染色定位于软骨细胞的细胞质及细胞膜,偶见细胞核。采用IHC和western blot两种实验方法在定性和定量水平上检测TGF-β1及IL-1β的表达结果一致,均可应用于科研及临床工作。2. MTT法检测原代培养兔终板软骨细胞中TGF-β1在一定浓度下可以促进软骨细胞的的增殖,当达到50pg/ml则表现为抑制增殖作用。IL-1β各浓度均起到抑制软骨细胞增殖的作用。