尼达尼布对放射性肺炎小鼠模型的肺保护作用及机制研究

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第一部分尼达尼布对放射性肺炎小鼠血清IL-1、IL-6、TNF-α、TGF-β1、FGF-2水平、组织病理的影响研究目的:探讨尼达尼布对放射性肺炎小鼠血清IL-1、IL-6、TNF-α、TGF-β1、FGF-2水平的作用及对组织病理的影响。方法:将60只SPF级C57BL/6雄鼠随机分为空白对照组、糖皮质激素组、高剂量组、低剂量组,每组15只。对每只小鼠进行单次20 Gy右肺辐照,照射结束后2 h开始给药。空白对照组采用生理盐水灌胃,糖皮质激素组予以地塞米松2.4 mg/kg灌胃,高剂量组、低剂量组分别予以尼达尼布60 mg/kg、30 mg/kg灌胃,1次/d,持续4周。4周后处死小鼠,使用ELISA法检测小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1、FGF-2水平。比较各组小鼠的生存时间,绘制Kaplan-Meier生存曲线并进行Log rank检验。每组随机选取1只小鼠取右侧肺组织行HE染色、Masson染色观察其炎症、胶原沉积及纤维化等情况。结果:使用尼达尼布干预后,高剂量组小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1、FGF-2水平较空白对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。低剂量组小鼠血清IL-6、TNF-α、TGF-β1、FGF-2水平较空白对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、FGF-2水平较糖皮质激素组降低(P<0.05);低剂量组小鼠血清中IL-6、FGF-2水平较糖皮质激素组降低。高剂量组、低剂量组、糖皮质激素组小鼠的生存时间分别为(27.61±2.54)d、(25.73±3.09)d、(24.65±3.16)d,长于空白对照组(21.62±3.42)d,差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组小鼠的生存时间长于低剂量组和糖皮质激素组,(P<0.05),糖皮质激素组和低剂量组小鼠生存时间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高剂量尼达尼布可以降低小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1、FGF-2水平,延长小鼠生存时间,且效果优于糖皮质激素组;低剂量尼达尼布可降低小鼠血清IL-6、FGF-2水平,效果优于糖皮质激素组。病理切片提示高剂量组炎性细胞浸润、水肿、肺泡壁增厚较空白对照组、糖皮质激素组减轻。第二部分尼达尼布对放射性肺炎小鼠TGF-β1-Smad2/3信号通路的研究目的:探索尼达尼布对放射性肺炎小鼠肺组织Smad2、Smad3蛋白表达的影响。方法:将60只SPF级C57BL/6雄鼠随机分为空白对照组、糖皮质激素组、高剂量组、低剂量组,每组15只。对每只小鼠进行单次20 Gy右肺辐照。照射结束后2 h开始给药,空白对照组采用生理盐水灌胃,糖皮质激素组使用地塞米松2.4 mg/kg灌胃,高剂量组、低剂量组分别予以尼达尼布60 mg/kg、30 mg/kg灌胃,1次/d,持续4周。4周后处死各组小鼠,使用Western Blot法检测右侧肺组织中Smad2、Smad3蛋白表达情况。结果:高剂量组小鼠肺组织Smad2、Smad3蛋白表达水平低于糖皮质激素组、空白对照组水平(P<0.05),低剂量组Smad2、Smad3蛋白水平较糖皮质激素组、空白对照组未见明显区别(P>0.05)。结论:高剂量组小鼠肺组织Smad2、Smad3蛋白表达水平低于糖皮质激素组、空白对照组水平,提示尼达尼布可以抑制放射性肺炎小鼠肺组织中Smad2、Smad3蛋白表达,降低下游炎症因子水平,缓解炎症及氧化应激,减轻放射性肺炎。
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