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目的通过观察乌苯美司(百士欣)对多发性骨髓瘤患者骨髓基质细胞表达细胞因子的影响,探讨乌苯美司对骨髓瘤细胞的抑制。方法1、细胞培养骨髓瘤基质细胞来源于3名Ⅲ期骨髓瘤患者,诊断及分期符合国内标准骨髓瘤培养应用以下方法：取骨髓肝素钠混合液10ml,用PBS稀释至20ml,缓慢加入15ml淋巴细胞分离液中,以3000r·min-1离心10min,取单核细胞层移至新离心管,加满PBS,以1200r·min-1离心10min,弃上清加入培养液(20%胎牛血清,青霉素100U·ml-1,链霉素100μg·ml-1的RPMI1640)中,接种于25ml培养瓶中,培养箱常规培养。每隔2-3日换液1次。取第三代、四代细胞应用于实验。2、药物浓度设定根据预实验及文献报道,设定实验中乌苯美司的浓度为500μg／ml、1000μg／ml、2000μg/ml。3、采用不同剂量乌苯美司处理骨髓基质细胞24小时,0.25%胰酶消化,移至1.5m1EP管内,1000rpm离心10分钟弃上清,PBS清洗一次弃上清,-80℃保存备用。4、半定量RT-PCR法检测乌苯美司处理前后的骨髓瘤患者骨髓基质细胞IL-6、ICAM-1基因的表达。参照RT-PCR检测试剂盒说明书操作进行,以未经乌苯美司作用的骨髓基质细胞做为对照。应用凝胶电泳分析系统软件分析PCR扩增产物与GAPDH的灰度比值。5、Western blot检测乌苯美司处理前后人骨髓瘤患者骨髓基质细胞内Bcl-2蛋白的表达。以未经乌苯美司作用的骨髓基质细胞做为对照。应用凝胶电泳分析系统软件分析Bcl-2与β-actin的灰度比值。6、根据资料性质选用t检验,使用SPSS13.0统计学软件对实验结果进行分析结果乌苯美司作用骨髓瘤基质细胞24小时,伴随药物浓度增加,ICMA-1、IL-6基因mRNA的表达逐渐下降。Westen blot检测Bcl-2蛋白的表达也逐渐下降。且两者均有明确的剂量依赖。结论本研究结果显示,乌苯美司处理过的骨髓瘤患者骨髓基质细胞IL-6、ICAM-1基因mRNA的表达明显减低,但具体的作用机制不清,推测可能与乌苯美司下调凋亡相关蛋白Bcl-2表达有关。对骨髓瘤基质细胞打击,可直接影响骨髓瘤的生长,将是一种崭新的抗肿瘤的思路。