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研究目的：NKT细胞是一类T细胞亚群,通过其相对恒定的Vα24-Jα18/Vβ11(小鼠为Vα14-Jα18)TCR识别CDld分子提呈的糖脂类抗原而活化。活化后的NKT细胞产生大量的细胞因子,调节天然免疫和适应性免疫应答。EB病毒在健康人群中感染普遍,约90%成人血清中可检测到EB病毒抗体。EB病毒是可能致癌的人类肿瘤病毒之一,霍奇金氏淋巴瘤和鼻咽癌的疾病发展情况及预后都与EB病毒感染情况相关。NKT细胞在肿瘤免疫中既发挥保护效应,也具有抑制性作用,但其潜在的作用机制还没有完全阐明,而且,其保护和抑制作用间是否相互影响、交叉调节,还有待进一步的研究。研究内容和方法：我们研究了6例霍奇金淋巴瘤(HL)患者、6例鼻咽癌(NPC)患者,6例正常对照组(EB病毒血清阴性健康个体,CN)和6例潜在EB病毒感染者(EB病毒血清阳性健康个体,LEI)。在研究中,应用流式细胞术、实时定量RT-PCR、ELISPOT、细胞杀伤活性检测等方法分别检测了各受试者外周血中CD8+NKT、CD4+ NKT细胞的数量、各NKT细胞亚群IFN-γ和IL-4等细胞因子的分泌及各亚群NKT细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。同时,我们构建了人胸腺联合免疫缺陷嵌合体(human-thymus-SCID)动物模型、人异基因肿瘤移植人胸腺联合免疫缺陷嵌合体(Humanized xenogeneic tumor transplanted human-thymus-SCID chimeras, HXTT H-T-SCID)动物模型,检测EB病毒刺激的CD4+ NKT细胞、CD8+ NKT细胞对肿瘤细胞的杀伤效应及比较各嵌合体动物模型肿瘤生长情况和动物存活率。研究结果：EB病毒相关恶性肿瘤(HL和NPC)患者CD8+ NKT细胞数量和功能受损:LEI和CN受试者,外周血单个核细胞中总NKT细胞数量高于霍奇金淋巴瘤和鼻咽癌患者；LEI和CN受试者中,约15%至30%NKT细胞是CD8+NKT细胞,而在霍奇金淋巴瘤和鼻咽癌患者,CD8+NKT细胞占NKT细胞的比例<3%；LEI和CN受试者CD8+NKT表达非常高水平的IFN-γ和低水平的IL-4,而霍奇金淋巴瘤和鼻咽癌患者CD8+NKT细胞表达低水平的IFN-γ。EB病毒刺激的CD8+NKT细胞抑制EB病毒相关肿瘤：LEI和CN受试者的CD8+NKT细胞能有效地杀死α-Galcer刺激的EB病毒相关霍奇金淋巴瘤细胞系和鼻咽癌细胞系,但不杀死非肿瘤细胞；在转移EB病毒刺激的胸腺CD8+NKT细胞(+T+DC)的HXTT H-T-SCID嵌合体：10周肿瘤大小基本维持在20rmm3；实验动物生存率显著增加,表现在两个肿瘤模型中,30%动物存活20周；同时还发现,EB病毒刺激的胸腺CD4+和CD8+NKT细胞(+T+DC)混合转移到人异基因肿瘤移植SICD小鼠嵌合体,能有效地抑制霍奇金淋巴瘤和鼻咽癌的局部肿瘤生长,18周左右,肿瘤的大小维持在10 mm3,且实验组动物存活100%超过20周。研究意义：在本研究中,我们比较了24例受试者(包括EB病毒相关肿瘤患者和对照组)外周血中NKT细胞各亚群的数量和细胞功能,同时运用人胸腺SCID (human-thymus-SCID)嵌合体动物模型来研究EB病毒诱导的NKT细胞亚群对肿瘤的免疫效应。从而系统、全面地探讨人EB病毒诱导的NKT细胞在肿瘤免疫中的作用及相关机制。为治疗EB病毒相关恶性肿瘤,提供一个有用的治疗思路。