第一部分小鼠脊髓发育差异的形态学研究 目的:了解小鼠脊髓发育差异的形态学基础。 方法:以近交系小鼠C57BL／6J(B6)和A／J(A)为研究对象，多聚甲醛灌注固定后剥取脊髓，在颈膨大中段1／3处行冰冻横切片，尼氏染色，用LeicaQwin分析软件测量视野内神经元大小并对神经元数目进行计数。取脊髓标本行透射电镜观察，拍取照片并用ScionImage软件测量有髓神经纤维面积。 结果:C57BL／6J和A／J两个近交系的小鼠，其脊髓颈膨大横断面神经元的数目没有差异。神经元大小的差异主要体现在>~300像素这一等级中，而在300像素至200像素之间和200像素至150像素之间没有差异。在神经元大小有差异时，C57BL／6J的神经元大于同等级的A／J的神经元。电镜观察表明C57BL／6J小鼠的有髓神经纤维面积大于A／J小鼠，即C57BL／6J小鼠的有髓神经纤维较A／J小鼠粗。 结论:C57BL／6J和A／J小鼠脊髓发育差异在形态学上主要体现在神经元大小和有髓神经纤维横截面积方面，而不体现在神经元数目上，其中C57BL／6J的神经元比A／J的神经元大，其有髓神经纤维也比A／J小鼠的粗。 第二部分PCP4基因在小鼠脊髓发育中的表达和分布研究 目的:了解PCP4基因在A／J和C57BL／6J两种近交系小鼠脊髓发育中的表达和分布。 方法:运用RT-PCR方法，分析PCP4基因在A／J和C57BL／6J两种近交系小鼠出生1天、5天、1O天、20天、40天脊髓中的表达变化。将RT-PCR扩增的片段，用地高辛核酸标记试剂盒合成探针，运用原位杂交的方法分析PCP4基因在这两种小鼠脊髓颈膨大切片中的表达和分布变化。 结果:RT-PCR结果显示，PCP4基因在A／J和C57BL／6J近交系小鼠中均有表达。随着2种小鼠鼠龄的增加，PCP4的表达也逐渐增加，但也存在着表达差异：①表达高峰时间的差异，在C57BL／6J中，PCP4的表达在5天达到高峰，而A／J中，PCP4的表达在10天达到高峰，随后表达都下降，并处于稳定水平。②表达量的差异，出生1天时，C57BL／6JPCP4的表达量大于A／J，这种差异在5天时最明显，随后迅速下降，在鼠龄大于等于1O天后，PCP4在两种小鼠中的表达已没有差异。脊髓切片原位杂交结果显示，PCP4mRNA在生后1天、5天、10天、20天、40天都能被检测到，阳性信号主要见于脊髓灰质，白质中也有分布。在灰质中前角的信号强度大于后角。PCP4mRNA在神经元和神经胶质细胞中也都有表达，但在神经元中的表达强度大于胶质细胞。 结论:PCP4基因在A／J和C57BL／6J近交系小鼠中均有表达，其表达高峰时段和表达量存在差异；PCP4基因在脊髓中主要表达于灰质前角，并在神经元和神经胶质细胞中均有表达，但主要在神经元中表达。PCP4基因在2种近交系小鼠脊髓中的表达差异可能与脊髓发育差异相关。