辛夷多糖的分离纯化及抑菌、抗氧化活性研究

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辛夷(Flos magnoliae)是木兰科,木兰属,玉兰亚属种植物的未成熟花蕾,入药来源较多,已报道的有28种。辛夷作为一种中药材,富含多种生物活性成分,是治疗鼻炎,鼻塞的特效药之一,具有抗过敏抗菌,提高免疫降压等作用。但目前关于辛夷多糖类成分的研究未见报道,本文以辛夷为原料,对其多糖组分进行提取、分离、纯化、结构鉴定、抗氧化活性和抑菌作用进行研究,结果如下:(1)通过水提、乙醇沉淀、Sevage法脱蛋白、双氧水脱色得到粗多糖;通过单因素试验及响应曲面法,对辛夷多糖提取工艺进行了优化,得到了的二次多项式模型方程为:Y=0.11+(6.087E-003)×A+(6.576E-003)×B+(1.458E-003)×C+(4.921E-003)×D-0.015×A×B+(1.250E-004)×A×C+(2.500E-004)×A×D+(9.125E-004)×B×C+(2.225E-003)×B×D+(3.838E-003)×C×D-0.022×A2-0.019×B2-0.013×C2-0.015×D2。优化后的提取工艺参数为:提取时间为3.5h,提取次数为2次,料液比为1:30,提取温度在75℃,辛夷多糖得率为10.92%。(2)用DEAE-52阴离子交换柱对水提的辛夷粗多糖进行柱层析分离,分别于水洗和碱洗部分得到2种组分,用Sephadex-100凝胶柱层析进一步纯化这两种组分,得到组分分别命名为WP和SP;最后再采用比旋光度法、高效液相色谱法验证两种组分为均一多糖组分,其分子量经测定分别为2.357×105Da、1.824×106Da。(3)用红外光谱来研究辛夷多糖WP和SP构型,3600cm-1、3200cm-1、2900cm-1、1700cm-1、1500cm-1、1000cm-1附近区域有明显的多糖特征峰带。(4)气相色谱分析单糖组成,WP由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖5种单糖组成,SP由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖5种单糖组成。(5)辛夷粗多糖的体外抗氧化活性研究表明,辛夷粗多糖有较强的还原能力,在一定的浓度范围内,辛夷粗多糖对超氧阴离子自由基(O2-·)、羟基自由基(OH·)和DPPH-自由基均具有一定的清除能力,且与浓度正相关。(6)辛夷粗多糖对鼠伤寒杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉和烟曲霉都具有抑制作用;对大肠杆菌和鼠伤寒杆菌的最低抑菌浓度为5mg/mL,对金黄色葡萄球菌、烟曲霉和黑曲霉的最低抑菌浓度为2.5mg/mL;酸碱度对辛夷粗多糖的抑菌活性有影响,在pH4-8的范围内,辛夷粗多糖表现出良好的抑菌活性;紫外线照射对辛夷粗多糖的活性也有一定的影响。
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