湖北省烟草病毒病毒原种类的鉴定

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烟草病毒病是全世界烟草种植区的重要病害之一,严重影响烟草的产量和品质。湖北是我国烟草种植大省,近年来,烟草病毒病的发生危害呈上升趋势,为了弄清湖北烟草病毒病的种类,在本省十堰、襄阳、恩施、宜昌主产区部分烟草品种病毒病的田间调查的基础上,在室内对采集的366份样本进行了毒原种类的鉴定。1.湖北省烟草病毒病类型主要为花叶型、畸形、闪电斑型、脉坏死型、蚀纹型和环斑型,以花叶型为主,等其他类型发生较少,并伴有2种或2种以上症状复合的混合型症状;十堰、襄阳以花叶型为主,恩施、宜昌以花叶型和畸形为主,且目前仅在襄阳地区发现有环斑症状。2.指示植物法检测结果显示,接种的10种指示植物上的症状表现有花叶、明脉、畸形、局部枯斑、褪绿、蚀刻和环斑,且不同的病毒病症状类型在不同的指示植物上表现不同,初步推断这些样本含有烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus, TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)、马铃薯X病毒(Potato X virus, PVX)、马铃薯Y病毒(Potato Y virus, PVY)、烟草蚀纹病毒(Tobacco etch virus, TEV)、烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus, TRSV)等6种病毒。3.血清学检测结果显示,TMV、CMV、PVX、PVY、TEV、TRSV的检出率分别为92.1%、42.1%、45.6%、35.0%、22.4%、12.6%,TMV检出率最高,为优势毒原,不同地区毒原分布和优势毒原种类略有差异;检测出的复合侵染率达70.8%,共有29种复合侵染类型,以TMV+PVX检出率最高,不同地区复合侵染率和优势复合侵染类型差异明显。4.不同烟草品种病毒病侵染状况不同。烤烟样本TMV、CMV、PVX、PVY、 TEV、TRSV的检出率分别为85.5%、47.1%、51.6%、24.0%、22.2%、19.9%,复合侵染率65.6%,共有25种复合类型,以TMV+CMV+PVX+PVY+TEV+TRSV检出率最高;白肋烟样本TMV、CMV、PVX、PVY、TEV、TRSV的检出率分别为93.2%、37.5%、36.4%、23.9%、21.6%、2.2%,复合侵染率65.9%,共有15种复合类型,以TMV+PVX检出率最高;马里兰烟样本TMV、CMV、PVX、PVY和TEV的检出率分别为100%、29.8%、36.8%、94.7%、21.1%,复合侵染率98.2%,共有7种复合类型,以TMV+PVY检出率最高。5.分子生物学检测结果显示,获得了TMV313bp的目标片段,TMV分离物间核酸同源性为98.4%~100%,与已注册的TMV CP基因核酸同源性为96.81%~99.68%;获得了CMV326bp的目标片段,CMV分离物间核酸同源性为93.6%~100%,与已注册的CMV CP基因核酸同源性为92.64%~97.55%;获得了PVY825bp的目标片段,PVY分离物间核酸同源性为98.9%~100%,与已注册的PVY CP基因核酸同源性为96.85%~97.45%。本研究首次检测出国内检疫病毒TRSV和省内检疫病毒TEV,亦首次对我国马里兰烟病毒病的发生进行了大田调查,为湖北省烟草病毒病的防治提供了一定的理论依据。
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