目的建立弓形虫( Toxoplasma gondii )、肠出血型大肠杆菌(Enterohehemorrhagic Escherichia coli)O157:H7、痢疾志贺菌(S.dysenteriae)、霍乱弧菌(V.cholera)、副溶血性弧菌(V. parahaemolyticus)、轮状病毒(Rotavirus)G3型及Norwalk病毒(Norovirus)GII型七种病原体的LAMP或RT-LAMP检测方法。方法以各病原体的特异基因为靶序列, PrimerExplorer V3设计4~6条LAMP引物,利用TIAamp Genomic DNA Kit或酚氯法提取病原体DNA、利用QIAamp viral RNA mini kit提取病原体RNA,配制LAMP或RT-LAMP反应体系,优化反应体系并建立七种病原体检测方法;65℃保温约60 min,完成对靶病原体基因的扩增,扩增结果通过肉眼、SYBR Green I染色及电泳来判定。LAMP扩增产物经酶切进一步鉴定;设立对照组评价特异性;10倍系列稀释模板检测敏感性。结果模板经LAMP后,肉眼、SYBR Green I染色和电泳均能观察到LAMP扩增产物的出现,电泳后呈LAMP特征性梯状条带,对照组均无扩增产物;七种病原体LAMP扩增产物经相应限制性内切酶酶切鉴定正确;结果显示七种病原体LAMP检测方法特异;LAMP可检测到弓形虫、肠出血型大肠杆菌(EHEC)O157:H7、痢疾志贺菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌、轮状病毒G3型及Norwalk病毒GII型的最低浓度分别是1 pg/μL、10 cfu/ mL、12 cfu/mL、20 cfu/mL、10 cfu/mL、15.6 pg/管、25 pg/管,高于或与PCR敏感性相当。结论建立了七种病原体特异、敏感和快速的LAMP检测方法。