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大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌是医院感染常见的革兰氏阴性杆菌，第三代头孢菌素的广泛使用使细菌对这些药物产生了耐药，产生超广谱β-内酰胺酶(Extended-spectrum β-lactamases, ESBLs)是革兰氏阴性菌对第三代头孢菌素耐药的主要原因。自1983年首次报道发现第一个ESBLs TEM-3后，ESBLs的流行日益严重，世界各地均有报道，且数量和基因型不断增加。ESBLs通常为质粒介导，同一质粒可同时携带多个耐药基因，引起多重耐药。最常见的ESBLs由TEM-1、2和SHV突变而来。TEM和SHV型酶种类多，地域分布广，主要由克雷伯氏菌属和大肠埃希菌产生，它们大部分是头孢他啶酶，少部分是头孢噻肟酶。其次还有头孢他啶酶PER、VEB、TLA-1、GES／IBC和头孢噻肟酶CTX-M(Toho)、SFO-1、BES-1等。本研究以大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌作为主要的研究对象，以三个常见的基因型TEM型、SHV型和CTX-M型为检测对象，鉴定两种细菌产ESBLs的情况，同时探讨ESBLs对临床常用的头孢他啶、头孢噻肟、头孢呋辛和头孢哌酮的耐药性和水解性的关系，对进一步认识超广谱β-内酰胺酶和临床合理使用抗生素有指导意义。 第一部分研究中，通过对近两年(2004-2005)北京地区医院收集到的共295株大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌，进行产ESBLs菌株表型鉴定、PCR检测基因型、等电聚焦电泳鉴定等电点和测序，并对这些菌株耐药的特性和基因型进行了探讨。表型鉴定发现：ESBLs的检出率为18.6％，其中大肠埃希菌的检出率为27.7％，肺炎克雷伯杆菌的检出率为8.57％。大部分产ESBLs肺炎克雷伯杆菌对头孢噻肟耐药，占66.7％，但对头孢他啶耐药仅占33.3％。大部分产ESBLs大肠埃希菌对头孢噻肟和头孢他啶均耐药，分别占46.5％和58.1％。 耐药基因型鉴定发现：引起耐药的基因型主要为TEM型81.8％(45／55)，其次CTX-M型74.5％(41／55)，然后是SHV型20％(11／55)。大肠埃希菌以TEM型为主(88.4％)，其次CTX-M型(67.4％)，43株中仅检测到2株产SHV型(4.65％)：肺炎克雷伯杆菌以CTX-M为主(91.7％)，其次是SHV型(75％)和TEM型(58.3％)。在本实验中检测到产2种基因型以上的细菌占70.9％(39／55)，大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌分别为67.4％和83.3％。实验中未检测到CTX-M-2型酶。经等电聚焦电泳验证，少数菌株的耐药由TEM、SHV、CTX型酶之外的ESBLs