目的:由乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染引起的乙型肝炎仍是世界范围内的一个公共问题。预防接种乙肝疫苗是降低HBV感染并阻断HBV传播的有效方法。无乙肝表面抗体保护的人群有感染HBV的风险,目前关于乙肝疫苗无应答的机制尚无明确解释。研究表明,肠道微生态可影响固有免疫和适应性免疫,通过粪菌移植将健康供体粪便微生物转移至患病个体胃肠道可调节肠道菌群。本研究旨在通过抗生素混合物干预小鼠肠道菌群和通过粪菌移植重建肠道菌群后,探讨肠道菌群对小鼠乙肝疫苗应答能力的影响并初步探讨其发生机制。方法:本研究采用的实验方法包括:1.用抗生素混合物干预成年小鼠和幼年小鼠的肠道菌群,给其注射乙肝疫苗后用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血浆中乙肝表面抗体Ig G的浓度。2.使用16S r DNA高通量测序检测小鼠肠道菌群的组成情况。3.使用液相色谱-质谱联用技术的方法检测小鼠肠道菌群代谢产物。4.使用粪菌移植的方法将幼年健康小鼠粪便或抗生素混合物干预过的幼年小鼠粪便移植给已由抗生素混合物干预过肠道菌群的幼年小鼠,注射乙肝疫苗后用ELISA技术检测小鼠血浆中乙肝表面抗体Ig G、Ig G1和Ig G2a浓度。5.流式细胞技术检测小鼠外周血和脾脏中浆细胞、浆母细胞和生发中心B细胞(Germinal center B cell,GC B)的比例。结果:实验结果表明:1.幼年小鼠经抗生素混合物干预肠道菌群后,其对乙肝疫苗的应答能力下降;而成年鼠经抗生素混合物干预肠道菌群后,其对乙肝疫苗的应答能力不受影响。2.使用抗生素混合物导致幼年小鼠肠道菌群组成发生了明显改变,门水平上,厚壁菌门、变形菌门和放线菌门相对丰度降低,拟杆菌门和螺旋体菌门相对丰度升高;属水平上,乳酸杆菌属的相对丰度明显降低。3.抗生素混合物干预导致幼年小鼠粪便内代谢产物总数减少,检测到差异代谢产物包括维生素、氨基酸、脂肪酸等。经KEGG功能注释后发现差异代谢产物涉及的代谢途径主要包括辅助分子和维生素代谢、氨基酸代谢和能量代谢等。4.通过粪菌移植重建肠道菌群后,小鼠受损的乙肝疫苗应答能力恢复,血浆中乙肝表面抗体Ig G、Ig G1和Ig G2a浓度均升高。5.粪菌移植重建肠道菌群后,因抗生素混合物干预引起减少的外周血及脾脏内浆细胞和浆母细胞比例升高。6.幼年小鼠脾脏中GC B细胞在抗生素混合物干预肠道菌群后比例减少,重建肠道菌群后生GC B细胞比例增加。结论:本研究表明:1.抗生素混合物干预肠道菌群导致幼年小鼠体液免疫能力受损,使其对乙肝疫苗的应答能力降低。2.抗生素混合物干预肠道菌群导致厚壁菌门、变形菌门、放线菌门和乳酸杆菌属相对丰度降低,同时引起维生素代谢、氨基酸代谢、能量代谢失衡,与幼年小鼠对乙肝疫苗低应答有关。3.粪菌移植重建肠道菌群可改善幼年小鼠受损的乙肝疫苗应答能力。抗生素混合物干预或粪菌移植可影响脾脏和外周血中浆细胞和浆母细胞比例并可影响脾脏中GC B细胞比例,是肠道菌群影响小鼠乙肝疫苗应答能力的机制之一。