老年性痴呆同病异证的实验研究

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目的:本课题以AD的两个病证结合模型:病(老年性痴呆,简称AD)加证(肾阳虚、痰浊阻窍)为研究对象,以该病的六个主要发病机制,即Tau蛋白异常、淀粉样前体蛋白代谢失调、胆碱能系统紊乱、神经细胞凋亡、泛素-蛋白酶体通路(UPP)异常、免疫炎症反应等的相关系列指标:Tau蛋白、Aβ、Ach和Ach E、Bax和Bcl-2、Ub和E1、P65为研究内容,利用分子生物学技术手段,探索AD两个典型证候的生物学内涵,寻找AD“同病异证”在生物学机制方面的共性及特异性。方法:将13只6月龄SAMR1小鼠分为正常组,39只6月龄SAMP8小鼠随机平均分为3组,每组13只,分别为AD模型组(简称模型组)、肾阳虚证AD模型组(简称肾虚组)、痰浊阻窍证AD模型组(简称痰浊组)。肾虚组采用腹腔内注射氢化可的松的方法复制肾阳虚证AD模型;痰浊组采用饲喂6W高脂饲料的方法复制痰浊阻窍证AD模型。模型复制成功后,采集所需标本,分别从光镜(肝脏和肾脏组织)、电镜(海马)、生化指标(血液、海马和大脑皮层)等不同层面,寻找AD肾阳虚证与痰浊阻窍证在生物学机制方面的共性与特异性。结果:1.形态学结果小鼠肝脏、肾脏光镜及海马电镜结果显示,正常组小鼠的肝脏、肾脏及海马组织超微结构未见明显异常;模型组小鼠的肝脏、肾脏及海马组织超微结构有轻度损害;痰浊组小鼠各组织的损害较正常组略重,肾虚组小鼠各组织的损害最重。2.海马、大脑皮层和血液生化指标检测结果2.1模型组与正常组比较:两组小鼠大脑皮层中Tau蛋白、Aβ和海马中Bax含量有显著性差异(P<0.05),模型组Tau蛋白、Aβ、Bax含量较正常组高。两组小鼠在大脑皮层中Ach和AchE以及海马中Bcl-2、Ub和E1、P65指标方面均无显著性差异。2.2肾虚组与正常组比较:两组小鼠血液中ACTH和CORT含量均有显著性差异(P<0.05),肾虚组小鼠ACTH和CORT含量较正常组低。2.3痰浊组与正常组比较:两组小鼠血液中TG含量有显著性差异(P<0.05),痰浊组TG含量较正常组高,且为正常组TG含量的1.56倍。2.4肾虚组与痰浊组比较:肾虚组小鼠大脑皮层中Tau蛋白、Aβ和海马中Bax含量较痰浊组高,海马中Bcl-2含量较痰浊组低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组小鼠大脑皮层中Ach和AchE及海马中Ub和E1、P65含量无统计学差异。结论:肾阳虚证与痰浊阻窍证时AD的以下三个机制,即Tau蛋白异常、淀粉样前体蛋白代谢失调和神经细胞凋亡会有明显的异常,肾阳虚证时此三种机制的异常较痰浊阻窍证时更明显,肾阳虚证时AD小鼠大脑的损害较痰浊阻窍证时的损害表现更突出。
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