【摘 要】
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AtECB2蛋白是一个已报道的定位于叶绿体的蛋白,它属于PPR蛋白家族中的DYW亚群。以前的实验证明该蛋白参与到accD和ndhF的RNA编辑过程,即这两个基因的在RNA转录中发生了特异性的
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AtECB2蛋白是一个已报道的定位于叶绿体的蛋白,它属于PPR蛋白家族中的DYW亚群。以前的实验证明该蛋白参与到accD和ndhF的RNA编辑过程,即这两个基因的在RNA转录中发生了特异性的胞嘧啶(Cytidine)到尿嘧啶(uridine)的转变。在本论文中,我们制备了针对该蛋白的特异性的多克隆抗体,通过RNA免疫共沉淀实验(RIP)实验证明该蛋白质直接结合在其所参与的三个编辑位点上下游约200b的位置上;并且将含有PPRmotif的一段蛋白质体外诱导表达成功。RARE1据报道参与到accDRNA编辑的一个PPR蛋白质。酵母双杂交实验证明RARE与AtECB2蛋白质的一段DYW结构域在酵母体内并没有相互作用。同时,我们分析了atecb2-2突变体。在早期发育过程中,该突变体的真叶呈现一个由黄转绿的表型,透射电镜结果显示该突变体早期真叶叶绿体发育有缺陷,随着真叶转绿,叶绿体发育逐渐正常。Northernbolt实验证实在这个转绿的过程中,rbcL的活性可以恢复到野生型水平,但是整个PEP的活性并没有完全恢复。这暗示着,该蛋白的突变除了影响RNA编辑外,可能影响PEP的活性,进而阻碍叶绿体的发育。
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