优化徐淮白山羊卵母细胞体外成熟及其受精卵体外培养体系的研究

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本文研究了肝素、采卵季节、激素以及不同细胞因子对徐淮白山羊卵母细胞体外成熟、体外受精及其受精卵体外培养的影响,主要结果如下:1.在BO液中添加浓度为10μg/mL的肝素诱导徐淮白山羊精子体外获能,对卵母细胞的体外受精最有利。2.与10~1月份相比,3~6月份的徐淮白山羊卵巢可采集到更多的可用卵母细胞。季节对徐淮白山羊卵母细胞的体外成熟有显著的影响(P<0.05),3~6月份卵母细胞的成熟率更高,而对卵母细胞的体外受精则无显著的影响(P>0.05)。3.在徐淮白山羊卵母细胞成熟培养液中添加激素能有效提高成熟率、2-cell率(P<0.01)和囊胚率(P<0.05),添加10单位/mL FSH、30单位/mL LH和lμg/mL E2时的效果最好。4.在徐淮白山羊成熟培养液和受精卵培养液中,试验组单独添加不同浓度的GDNF、LIF、SCF与对照组相比其成熟率、2-cell率、4~16-cell率和囊胚率差异极显著(P<0.01)。添加LIF组对山羊早期胚胎的发育都好于SCF组、GDNF组。但从整体看分别添加15 ng/mL的GDNF组、10 ng/mL的LIF组、10 ng/mL的SCF组的效果最好。5.三种细胞因子间存在协同作用,有效地促进了徐淮白山羊卵母细胞体外成熟和胚胎的早期发育,在成熟培养液和受精卵培养液中添加浓度为10 ng/mL LIF、10 ng/mL SCF、10 ng/mL GDNF组能有效提高卵母细胞的成熟率和早期胚胎的发育潜能。
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