论文部分内容阅读
鸡骨草（Abrus cantoniensis Hance）是广东、广西道地中草药之一，又名广东相思子，具有清热解毒、疏肝止痛之功效，是当地重要的创汇药材之一。目前，国内外主要集中在鸡骨草多糖提取和除杂工艺上，在其分离纯化、纯化后多糖的结构特点、构效关系及生物活性等方面的研究甚少，本文从鸡骨草多糖的分离、纯化、结构特点和抗氧化作用等方面展开了系统的研究。主要研究结果如下：检测了鸡骨草干品中的总糖、粗脂肪、灰分、水分，其含量分别3.070.78%，0.360.03%，4.60.19%，11.00.24%。其次，鸡骨草中矿物质元素非常丰富，其钙、镁、铁、锌含量分别为656.221.58、80.970.67、19.921.80、3.370.02mg/100g。鸡骨草经热水浸提，D354FD树脂脱色、Sevag法脱蛋白、75%乙醇醇沉后得到鸡骨草粗多糖ACP，使用DEAE Cellulose-52离子交换柱柱层析分离粗多糖ACP，考察了采用NaCl作为洗脱剂洗脱鸡骨草中酸性多糖的工艺条件，实验结果表明，使用0.2mol/LNaCl可以将鸡骨草中的酸性多糖洗脱下来，最后制备出鸡骨草多糖中的中性多糖ACP-0.0和酸性多糖ACP-0.2，经高效凝胶渗透色谱分析，ACP-0.0的分子量为9.05kDa，ACP-0.2的分子量为19.90kDa和67.96kDa。采用多种技术分析了ACP-0.0和ACP-0.2的基本结构特点，紫外光谱扫描显示ACP-0.0和ACP-0.2在260nm、280nm处没有明显的吸收峰，说明其中不含有核酸和蛋白质；红外光谱图显示，两者均具有多糖的特征吸收峰，且都具有吡喃型糖环，ACP-0.0显示主要以-糖苷键连接方式，ACP-0.2同时存在-糖苷键连接和β-糖苷键连接；采用了高效液相色谱联用蒸发光检测法（HPLC-ELSD)与高效阴离子交换色谱联用脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)分析了ACP-0.0和ACP-0.2的单糖组成，结果表明ACP-0.0是一种葡聚糖，主要由葡萄糖组成；ACP-0.2为杂多糖，含有鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖，摩尔比为：鼠李糖：阿拉伯糖：半乳糖：葡萄糖=1:3.4:3.6:10.9（HPLC-ELSD)，1:3.46:4.56:10.22(HPAEC-PAD)。核磁共振结果表明ACP-0.0可能存在-D-(1→3)-Glcp-A连接，ACP-0.2可能存在1,5--Arap和1,6-β-Galp-连接，以及-L-Rha连接。采用细胞模型抗氧化能力（CellularAntioxidantActivity, CAA）评价法和氧自由基吸收能力（Oxygen Radical Absorption Capacity, ORAC）法评估了鸡骨草多糖的抗氧化作用效果，结果发现鸡骨草多糖的酸性多糖组分的抗氧化作用效果优于中性多糖的抗氧化效果，同时发现CAA法虽然具有生物相关性，但不适宜用于检测鸡骨草多糖的抗氧化活性。