参麦提取物制备工艺及含量测定研究

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目的:研究表明皂苷和多糖类成分具有丰富的药理活性,人参皂苷Rg3和Rh2具有显著增强免疫力的功效,但只存在于红参中且含量极低,本文旨在获得含有丰富皂苷、多糖类成分且人参皂苷Rg3和Rh2含量较高的参麦提取物,并对提取物进行含量测定研究。方法:通过对比红参、麦冬药材的单提和合提不同提取方式的总皂苷和总糖含量,确定提取方式;通过正交试验法研究提取溶剂倍量、提取时间和提取次数对总皂苷和总糖收率的影响,优选出最佳提取工艺;利用大孔树脂法分离红参麦冬合提液中的皂苷和糖,并考察相关参数纯化皂苷部分;全面考察人参茎叶提取过程中的溶剂用量、提取时间参数,通过大孔树脂法纯化最佳提取工艺药液中的人参皂苷作为转化工艺底物;转化工艺分别考察生物转化法中的酶转化和化学转化法中的酸转化过程中各参数,对比两种最优转化工艺效果,进而确定转化工艺的方式和方法;采用紫外可见分光光度计法、高碘酸钠滴定法和高效液相色谱法分别对提取物进行含量测定研究。结果:1.红参、麦冬采用合提方式,合提工艺的正交试验结果分析和验证样品结果显示红参麦冬合提最佳提取工艺为5倍纯化水提取3次,每次1.5 h,总皂苷含量约为2.90%,总糖含量约为52%,固形物约为53%。2.利用AB-8大孔树脂分离法,对红参和麦冬合提工艺的药液进行纯化工艺考察,结果为最大上样体积为0.7 BV(上样液约为0.5 g·mL-1),水洗脱总糖体积为3 BV,最后95%乙醇洗脱皂苷体积为4.5 BV,纯化后总皂苷含量约为2.49%。3.人参茎叶最佳提取工艺为分别以10倍、8倍、8倍纯化水提取3次,每次1 h,最终得到含有0.34%的Rb1的提取液;纯化工艺同样利用AB-8大孔树脂法,最大上样量为2 BV(上样药液约为0.2 g·mL-1),纯化水冲洗2 BV除去糖类等物质,0.5 mol·L-1 NaOH的20%乙醇溶液冲洗3 BV,结合纯化水冲洗3.5 BV,除去叶绿素等杂质并将pH调至中性,6 BV的70%乙醇洗脱皂苷,最终得到含有0.29%人参皂苷Rb1的纯化药液。4.人参茎叶皂苷最佳转化工艺为醋酸转化法,当乙酸浓度为15%,反应温度在90℃100℃,反应时间为1.5 h时,可以得到约0.99%1.10%的人参皂苷Rg3和Rh2。5.对所得的三份提取物进行含量测定研究,测得提取物中含有25.07%红参麦冬总皂苷、67.72%红参麦冬总糖和11.79%人参皂苷Rg3和Rh2。结论:1.通过提取方式对比实验和正交试验设计,以总皂苷和总糖为指标,综合考察,建立了红参和麦冬药材合提最佳提取工艺。2.利用AB-8大孔树脂法,确立了红参和麦冬的纯化工艺,纯化获得红参麦冬总皂苷提取物,且同时获得总糖部分提取物。3.建立了人参茎叶最佳提取工艺和最优纯化工艺,均以人参皂苷Rb1为考察指标。4.建立了同时检测稀有皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、20(S)-Rh2、20(R)-Rh2的高效液相色谱方法,系统地考察了转化工艺中的各项参数,确定了转化效果最好且适于生产的醋酸转化工艺。5.对所得提取物进行含量研究,为本项目提取物在之后生产上的含量控制提供了参考基础和科学依据。
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