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第一部分褪黑素对大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤神经保护作用的研究目的：应用蛛网膜下腔出血后早期脑损伤模型,探讨褪黑素对大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤是否具有神经保护作用。方法：48只健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组(n=12),SAH组(n=12),安慰剂组(n=12)和褪黑素治疗组(n=12)。应用视交叉前池一次注血法制成SAH后EBI模型,在蛛网膜下腔出血后2h和24h分别腹腔注射褪黑素,48小时后处死大鼠,取颞底皮层脑组织做标本,测定脑水肿变化及血脑屏障变化；同时观察SD大鼠行为功能变化,进行神经功能评分,探讨褪黑素对大鼠SAH后EBI是否具有神经保护作用。结果：与对照组相比,SAH组大鼠神经认知功能明显降低,食欲及活动能力明显降低,脑组织含水量明显增加,48h时水肿百分数达到82.51%,血脑屏障破坏明显,48h时测定皮层脑组织EB含量达到21.5ng/mg与SAH组相比,褪黑素治疗后大鼠神经功能明显改善,脑水肿指数降低,48h时水肿百分数80.55%,血脑屏障功能改善,48h时测定皮层脑组织EB含量13.2ng/mg;安慰剂组与SAH组相比改善不明显。结论：1.通过构建大鼠SAH模型,能够观察到大鼠SAH后48h神经认知功能明显降低,脑组织水肿含量增加明显,血脑屏障破坏明显,说明SAH后存在EBI。2.应用褪黑素治疗后,能有效降低SAH后脑水肿、改善血脑屏障,改善神经认知功能,提示褪黑素对大鼠SAH后EBI具有神经保护作用。第二部分褪黑素对大鼠SAH后大脑皮层Nrf2-ARE传导通路的调控作用目的：研究SAH后大脑皮层Nrf2-ARE传导通路及其下游产物的表达变化及褪黑素对Nrf2-ARE传导通路的干预作用,探讨褪黑素对SAH后EBI神经保护作用机制。方法：48只健康成年雄性SD大鼠随机分为：对照组(n=12),SAH组(n=12),SAH+安慰剂组(n=12)和SAH+褪黑素治疗组(n=12)。采用立体定向注射技术,构建视交叉前池一次注血SAH模型,对照组开骨窗但不注入动脉血,褪黑素治疗组给予褪黑素注射治疗,每次注射剂量150mg/kg,在SAH后2h、24h分别腹腔注射,共注射2次。安慰剂组注射等容量溶剂,溶剂为1%乙醇。48小时后处死大鼠,取颞底皮层脑组织做标本,采用Western blot法测定Nrf2、HO-1表达情况;免疫组化法检测Nrf2及HO-1表达,RT-PCR测定HO-1、NQO1及GST-α1的mRNA表达,酶活性检测NQO1及GST-α1,TUNEL技术测定神经细胞凋亡结果：Western blot结果显示对照组Nrf2和HO-1蛋白水平较弱；与对照组相比,SAH组Nrf2和HO-1蛋白水平明显增高(P<0.05);SAH组与安慰剂组对比无明显差异(P>0.05);褪黑素治疗组中Nrf2和HO-1蛋白水平明显高于安慰剂组(P<0.01)。免疫组化(Nrf2和HO-1蛋白免疫反应性主要在神经元细胞,细胞质棕色黄染代表阳性)结果显示对照组Nrf2和HO-1阳性率较低；与对照组相比,SAH组Nrf2和HO-1阳性率明显增高(P<0.01);SAH组与安慰剂组对比无明显差异(P>0.05);褪黑素治疗组中Nrf2和HO-1阳性率低于SAH组及安慰剂组(P<0.05)。RT-PCR结果显示对照组HO-1、NQO1及GST-α1的mRNA表达水平较弱；与对照组相比,SAH组HO-1、NQO1及GST-α1的(?)mRNA表达水平明显增高(P<0.01);SAH组与安慰剂组对比无明显差异(P>0.05);褪黑素治疗组中HO-1、NQO1及GST-α1的mRNA表达水平明显高于SAH+Vehicle组(P<0.01)。酶活性检测提示SAH及安慰剂组NQO1及GST-α1的酶活性明显高于对照组(P<0.01),SAH组与安慰剂组对比无明显差异(P>0.05),褪黑素治疗组NQO1及GST-α1的酶活性明显高于SAH组(P<0.01,P<0.05)。细胞凋亡结果显示对照组脑组织中有细胞凋亡;与对照组相比,SAH+Vehicle组脑组织细胞凋亡指数明显高于对照组(P<0.01);SAH组与Vehicle组对比无明显差异(P>0.05);褪黑素治疗组脑组织细胞凋亡指数明显低于SAH组与Vehicle组(P<0.01)结论：SAH后早期能激活Nrf2-ARE传导通路,激活其下游的抗氧化酶及解毒酶的表达而达到保护神经细胞的作用,褪黑素可能通过激活此传导通路对SAH后EBI起到神经保护作用。