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前列腺癌是威胁男性生命的主要疾病之一,关于其侵袭和转移的分子机制需要更深入的研究。Maspin是丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族中的一员,在前列腺癌的侵袭与转移中起着非常重要的作用。Maspin表达于正常的哺乳动物上皮细胞中,在原发性前列腺癌细胞中表达下降,在转移性前列腺癌中表达缺失。对maspin基因功能的研究表明:Maspin在体外可以抑制人前列腺癌细胞的侵袭和移动,体内可以抑制裸鼠前列腺癌细胞的生长与转移。而且,Maspin是一有效的血管生成的抑制剂。把前列腺癌细胞LNCaP植入裸鼠的皮下,再用外源性的重组Maspin治疗裸鼠,发现Maspin可以抑制肿瘤细胞的生长和血管的生成。Maspin不仅在侵袭和转移水平抑制前列腺癌的发展,还可以增强肿瘤细胞的凋亡。无论是体外还是体内,内皮细胞中maspin基因的过表达都可以诱导内皮细胞的凋亡,其诱导作用可以被Caspase的抑制剂阻断。Maspin的表达谱及其生物学功能都说明,Maspin可以发展成为一种有效的治疗前列腺肿瘤的靶点。因此,我们有必要在前列腺癌细胞中研究maspin基因的表达调控。 Maspin基因定位于人染色体18q21.3,编码约3.0kb的mRNA转录体,然后翻译成42kDa的蛋白质。Maspin主要存在于多种器官的上皮细胞的细胞膜和细胞质中,细胞核中也有一定的表达。Maspin的cDNA是从正常人的上皮细胞中分离获得,包括2584个核苷酸。对正常细胞和肿瘤细胞中maspin基因的序列分析发现:在肿瘤细胞中maspin基因的序列和结构并没有改变,推测maspin基因在肿瘤细胞中表达下降或缺失并不是基因突变引起的。本研究中我们克隆了含有(-764～+83)的847bp的maspin启动子的报告基因载体,并利用核酸缺失突变技术,报告基因分析和电泳迁移率改变分析(EMSA),在maspin基因启动区鉴定了影响其表达的两个