目的检测牙周健康者与不同程度牙周炎患者龈沟液内组织蛋白酶K浓度的变化,探讨牙周炎的炎症程度与龈沟液内该种因子的表达水平是否具有相关性,是否可能作为反映牙周炎症损害程度的参考指标,为辅助牙周炎的诊断提供相关理论基础。方法一、研究对象选取2018.10.09-2019.9.14就诊于赤峰学院附属医院口腔科患者104人,牙周健康者设立为对照组(A组),要求探诊深度≤3mm,无附着丧失及牙槽骨的吸收,共26人,13男,13女,平均年龄为38.12岁;诊断为牙周炎的患者设立为实验组B组,根据牙周病的国际新分类标准选择牙周炎分期中的前三期患者进行分组,分别为Ⅰ期牙周炎(B1组),Ⅱ期牙周炎(B2组),Ⅲ期牙周炎(B3组),每组亦为26人,共78人,37男,41女,平均年龄为42.50岁。入选患者对此次试验的目的、过程知情同意,并自愿参与试验。要求入选患者无全身系统性疾病,3个月内未服用抗生素及非甾体类抗炎药物,6个月内未行牙周治疗,不吸烟,妇女未妊娠者。二、数据采集对实验的两组患者测定下颌磨牙相关指标,包括:牙龈指数(GI)、探诊深度(PD)、附着丧失(AL)、X线片显示牙槽骨吸收程度(ABL)。三、龈沟液采集取出30号吸潮纸尖,去除尖端4.5mm的部分,照射消毒。四根纸尖为一组,放入已消毒的EP管内,编号,称重,记录后待用。用吸潮纸尖在选定的龈沟液采集点插入龈袋内采集龈沟液。采集完成后,将4根吸潮纸尖置于EP管中,再次称重,记录编号和重量,EP管前后重量之差即为收集的龈沟液重量。记录后将EP管封口,置-70℃冰箱内待检。实验前将样本常温下解冻,加入缓冲剂、震荡、离心,取部分上清液,待测。四、酶联免疫吸附法(ELISA法)检测组织蛋白酶K浓度在酶标板上设空白孔、标准品孔和待测样本孔。在标准品孔中加样品液,待测样本孔中加稀释后的样品液,封板温育后甩干。将酶标试剂(空白孔除外)加入洗涤后的各孔内,封板温育后甩干。再将显色剂A和显色剂B先后加入洗涤后的各孔内,轻摇混匀,避光显色15分钟。随后加入终止溶液,即刻测量各孔的吸光度(OD值)。用SPSS25.0统计软件进行统计学分析,选用适当统计学方法进行检验。结果牙周健康对照组A组龈沟液内组织蛋白酶K浓度平均值为53.26±5.70pg/ml;牙周炎实验组龈沟液内组织蛋白酶K浓度B1组平均值为67.66±4.40pg/ml,B2组平均值为64.72±6.04pg/ml,B3组平均值为61.27±4.67pg/ml。牙周健康对照组的组织蛋白酶K浓度低于牙周炎实验各组(P<0.05),随着牙周炎症的逐渐加重,B1、B2、B3三组的组织蛋白酶K的浓度逐渐降低,且四组之间均有差异(P<0.05)。实验组组织蛋白酶K浓度与GI无明显相关(P>0.05),与PD、AL、ABL均呈负相关(P<0.01),差异有统计学意义。结论1、牙周健康对照组龈沟液内组织蛋白酶K的浓度低于牙周炎实验组,随着牙周炎症逐渐加重,龈沟液内组织蛋白酶K的浓度逐渐降低。2、牙周炎的炎症程度与龈沟液内组织蛋白酶K的表达水平具有相关性,该种因子可能作为反映牙周炎症损害程度的参考指标。