外磁场作用下SPIO标记脂肪干细胞经尾静脉移植治疗急性脑缺血

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目的观察外置磁场能否提高超顺磁性氧化铁(superparamagneticiron oxide,SPIO)标记的脂肪干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)经尾静脉移植治疗SD大鼠急性脑缺血的成功率。方法分离并培养SD大鼠脂肪干细胞,流式细胞仪检测其免疫表型,SPIO标记脂肪干细胞,普鲁士蓝染色观察其标记率,分别用CCK-8法及台盼蓝染色法检测细胞不同条件下分裂增殖能力及细胞活性,标记细胞接种24小时后观察细胞聚集情况,Transwell试验验证标记细胞在外加磁场作用下是否可以定向迁移。线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAo)模型,随机分成未标记ADSCs静脉移植组(IC组),SPIO标记ADSCs静脉移植组(ICS组)和SPIO标记ADSCs静脉移植并外加磁场组(ICSM组),共3组,各组在细胞移植后1天,7天分别进行神经损伤严重程度评分(NSS),普鲁士蓝染色观察SPIO标记ADSCs在大脑内的分布情况,TTC染色比较缺血体积,原子吸收光谱仪测各组大脑铁含量。结果ADSCs不表达CD45表达CD29、CD54。SPIO标记脂肪干细胞阳性率接近100%。外磁场对细胞的增殖能力及活性均无负面影响(P>0.05)。接种24小时后观察,标记细胞向磁铁区聚集,距磁铁越近细胞数越多(P<0.01)。Transwell试验中磁场组细胞跨膜细胞数显著高于对照组和空白对照组(P<0.01),而对照组和空白对照组跨膜细胞数比较差异无显著性意义(P>0.05)。细胞移植后7天ICSM组动物较其他两组神经系统功能明显改善(P<0.05),缺血区普鲁士蓝染色阳性细胞增多,缺血体积显著减小(P<0.01),铁含量显著增多(P<0.01)。结论外磁场可以诱导SPIO标记的ADSCs在体内外的定向迁移,提高尾静脉移植ADSCs治疗急性脑缺血大鼠的成功率。
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