本研究旨在探索大肠杆菌对季铵盐型杀菌剂苯扎氯铵产生耐药性的分子机理，通过测定耐药基因的表达水平，及以反义RNA技术抑制耐药基因，以研究耐药基因与耐药表型之间的相关性。　　 本研究以大肠杆菌ATCC25922为研究对象，以琼脂稀释平皿法测定苯扎氯铵对它的最低抑菌浓度(MIC)值。以亚抑菌浓度(1/2MIC)法连续诱导10代，逐步提高培养基中BC的浓度，直到得到的耐药性比较稳定的耐药株。应用PCR法检测大肠杆菌固有的耐药基因acrA和acrB，以及可能携带的oqxA及qacEΔ1，未发现oqxA和qacEΔ1的存在，说明这种耐药性可能与大肠杆菌最重要的耐药系acrAB-tolC相关。建立实时荧光定量PCR方法对acrA和acrB基因进行定量分析，得到的数据采用SPSS19统计软件分析处理。同时，为了验证大肠杆菌对BC耐药性与acrAB-tolC系统的关系，以反义RNA的作用机理为依据，建立了acrA基因的反义RNA表达载体，导入耐药株，测定并比较重组菌在加IPTG，不加IPTG诱导条件下，以及原始耐药株的MIC值变化。结果相同培养条件下，耐药株的acrA，acrB基因表达水平均明显高于敏感株;耐药株在有药物的培养条件下，acrB基因表达水平明显高于无药物条件下，acrA表达水平无明显差异。对比原始耐药株，转入反义RNA表达载体的重组耐药株在加与不加IPTG诱导条件下，MIC值分别降低了35％和15％。　　 本实验以已有的研究成果为基础，从两方面展开研究，结果表明大肠杆菌对苯扎氯铵的耐药性机制与acrAB-tolC的过量表达有关，但也不排除其他机制。本实验构建的acrA-反义RNA表达载体，在诱导表达的条件下，能够使大肠杆菌对苯扎氯铵耐药性降低。推测是acrA基因的表达成功受到抑制，从而影响了acrAB-tolC系统的协同作用所致。本研究首次对大肠杆菌对苯扎氯铵的耐药性机制进行了深入探究，并且成功以反义RNA技术降低耐药性，为微生物耐药机制及治理微生物耐药性的新技术的研究提供了有效的实验数据和研究基础，具有一定的理论和实际意义。