茶叶中EGCG、ECG和GCG对B16F10细胞内黑色素生成的影响及机理研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sticker2009
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
对于女性来说,健康白皙是最理想的肌肤状态,而皮肤黑色素的含量及分布在很大程度上影响着肌肤的呈色。皮肤黑色素主要是产生于表皮基底层的黑色素细胞,黑色素细胞内酪氨酸酶的活性在皮肤受到紫外线照射后会被激活,增加黑色素的生成量,皮肤颜色加深变暗。随着化妆品行业的发展与成熟,消费者对美白产品的要求也不断提高,天然植物提取物因具有良好的美白效果且安全性好,成为医药学和化妆品行业研究的热点。茶叶含有广泛的生物活性成分,是具有保健功能和预防人体疾病的健康饮品。目前关于茶叶提取物美白功效的研究,大多集中于对体外酪氨酸酶活性的抑制作用,而以体外培养的黑色素细胞为对象,研究茶叶提取物对黑色素生成的影响还鲜有报道。国内对茶黄素(Theaflavins,TFs)和表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)抑制黑色素生成进行了少量研究,而国外也只研究了表儿茶素没食子酸酯(Epicatechin gallate,ECG)和没食子儿茶素没食子酸酯(Gallocatechin gallate,GCG)对体外蘑菇酪氨酸酶活性的抑制作用。本论文基于α-MSH信号通路,以B16F10黑色素瘤细胞作为受试细胞,研究了茶儿茶素EGCG、ECG、GCG对黑色素生成的影响及机理。本文主要研究结果如下:1.EGCG、ECG、GCG抑制B16F10细胞内黑色素的生成分别用不同浓度的EGCG、ECG、GCG和熊果苷处理B16F10黑色素瘤细胞,采用倒置显微镜观察茶儿茶素对细胞形态的影响,以溴化二苯四偶氮法(MTT法)测定B16F10细胞的增殖率,以左旋多巴(L-DOPA)为底物测定细胞内酪氨酸酶的活性,采用氢氧化钠裂解法测定细胞内黑色素的含量。试验结果表明,EGCG、ECG和GCG对B16F10细胞形态的影响表现为随浓度的增加细胞数目逐渐减少,对细胞生长有明显抑制作用。EGCG、ECG、GCG对B16F10细胞的增殖、酪氨酸酶活性以及黑色素生成量均有抑制作用(p<0.05),抑制作用随浓度的升高而增强,且ECG效果最优,EGCG次之并优于GCG,三者的作用效果均优于熊果苷(Arbutin,AR)。2.EGCG、ECG、GCG下调黑色素生成相关基因的表达采用实时荧光定量PCR检测细胞内小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)基因、酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)基因、酪氨酸相关蛋白1(Tyrosinase related protein 1,TRP-1)基因以及酪氨酸相关蛋白2(Tyrosinase related protein 2,TRP-2)基因的相对表达量。试验结果表明,相对于对照组,EGCG、ECG、GCG均下调MITF、TYR、TRP-1、TRP-2的表达,对MITF基因表达的下调作用最明显(p<0.01)。EGCG浓度为60μg·mL-1时,B16F10细胞中MITF基因表达量与对照组相比下调了70%,而ECG则对TYR基因表达的下调作用最为明显(p<0.01)。3.EGCG、ECG、GCG降低B16F10细胞内cAMP水平并下调黑色素生成相关蛋白的表达运用环磷酸腺苷(cyclic Adenosine monophosphate,cAMP)E-lisa试剂盒对B16F10细胞内cAMP水平进行检测,用Western blot技术检测EGCG、ECG、GCG和熊果苷对B16F10细胞中环磷腺苷效应元件结合蛋白1(cAMP-response element binding protein1,CREB1)、磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白1(phospho-cAMP-response element binding protein 1,p-CREB1)、小眼畸形相关转录因子、酪氨酸酶、酪氨酸酶相关蛋白1、酪氨酸酶相关蛋白2相对表达量的影响。试验结果表明,EGCG、ECG和GCG明显降低B16F10细胞内cAMP水平(p<0.01);相对于对照组,EGCG、ECG和GCG均下调CREB1、p-CREB1、MITF、TYR、TRP-1、TRP-2蛋白的表达,具有极显著差异(p<0.01)。
其他文献
随着信息技术及计算机网络在办公领域的不断深入,办公电子化、自动化的应用正变得越来越广泛,如何保证电子文档在传输过程中的完整性、有效性及文档发送方的不可抵赖性是我们
通过对患者使用留置尿管后,计患者及其家属了解和掌握在家庭护理中的注意事项和操作方法,以有效地预防和控制感染机会。针对患者及家属进行宣教工作,在技术上给予指导。掌握护理
本文介绍了国际电联关于4Kbit/s语音编码标准的四种候选算法^(1,2,3,4)详细讨论了改进的更新CELP编码,相位自适应PSI-CELP编码,MDP-CELP编码以及多模编码算法的原理,编译码器的结构及其性能分析。
2014年7月至8月,对贵州沿河大水洞内的动物进行了调查,共采集动物标本478号。经鉴定,隶属3门8纲10目18科20属23种,计算并讨论了该洞动物类群的群落结构及多样性。结果表明:多
为了实现我国社会的发展目标,逐渐扩大可持续发展战略的应用范围,需要采取必要的措施加强对环境污染问题的有效处理。实现这样的发展目标,应结合污染环境地质水文的实际概况,
《德意志意识形态》作为马克思、恩格斯世界历史思想的发祥地,是学术界研究马克思、恩格斯世界历史思想不可绕过的重要文本。本文旨在忠实《德意志意识形态》文本的基础上,通
分析下一代光接入技术的应用需求.简述10G-PON和后10G-PON的工作原理、关键技术和产业链发展情况。
本文以设计微波放大器为例,介绍了应用HP-EEsof进行微波电路CAD设计的全过程,并探讨了如何提高微波电路CAD设计的精确性等实际问题。
最小二乘问题在数据拟合、参数估计和控制理论等方面有着广泛的作用。本文将利用奇异值分解给出了线性方程Ax=b的最小二乘解的通解表达式以及广义逆的表达式,并对最小线性二