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目的本实验旨在探讨G-蛋白和酪氨酸激酶-Rho/ROK通路在15-羟化二十碳四烯酸（15-HETE）诱导缺氧大鼠肺动脉血管收缩中的作用，为研究肺动脉高压发病机制提供进一步的依据。方法采用组织浴槽血管环的方法观察ROK、G-蛋白和酪氨酸激酶在15-HETE诱导缺氧大鼠肺动脉血管收缩中的作用。应用小干扰RNA技术沉默15-LO后测定ROK的表达量，用来确定15-HETE对ROK的作用。采用Western blot和RT-PCR的方法检测内源性和外源性15-HETE对ROK蛋白及mRNA水平的影响，同时观察G-蛋白和酪氨酸激酶在这一过程中的作用。采用免疫细胞化学的方法检测15-HETE对ROK2蛋白由细胞核向细胞浆转位表达的作用。应用反向高效液相色谱法检测内源性12-HETE和15-HETE的含量。结果15-LO抑制剂，G-蛋白抑制剂和酪氨酸激酶阻断剂都能使缺氧肺动脉血管收缩力下降，说明缺氧条件下，Rho/ROK途径在15-HETE介导的大鼠肺动脉血管收缩过程中起重要的作用，G-蛋白和酪氨酸激酶也参与这个收缩机制；缺氧能显著增加肺动脉血管中代表Rho活性的磷酸化MYPT1的水平，这个磷酸化过程能被NGDA逆转；在大鼠肺动脉平滑肌细胞中，ROK在蛋白和mRNA水平的表达随着缺氧时间的改变而发生变化，在缺氧24h时，ROK的表达量最高；沉默15-LO的表达后，ROK的表达量显著降低，说明15-HETE确实对ROK有作用；缺氧和外源性15-HETE均能增加ROK的表达，而15-LO的抑制剂NDGA能阻断这一过程，并且G-蛋白和酪氨酸激酶作为ROK的上游信号在这一过程中起重要的作用；免疫细胞化学发现常氧条件下ROK2蛋白在细胞核内表达，缺氧时ROK2蛋白由细胞核向细胞浆转位，本次研究表明ROK2的转位过程是由15-HETE介导的，在相同的条件下，ROK1蛋白没有明显的转位；反向高效液相色谱法分析结果显示，缺氧条件下内源性15-HETE的水平较常氧条件下显著提高，内源性12-HETE的生成量较同条件下的15-HETE生成量显著减少，而NDGA能够明显降低缺氧引起的HETEs产量增加。结论以上的实验结果表明，在缺氧条件下，15-HETE作为重要的血管收缩因子可以增加Rho的活性，上调ROK的表达，同时，G蛋白和酪氨酸激酶两个途径作为ROK的上游信号在15-HETE介导的肺动脉血管收缩过程中起重要的作用。此外，15-HETE还参与缺氧诱导的ROK2由细胞核向细胞浆转位。