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细胞因子作为生物佐剂以增强疫苗，特别是DNA疫苗的免疫原性一直倍受关注。我们通过小鼠实验证明，犬白介素-2(IL-2)和犬IL-7基因对犬细小病毒VP2 DNA疫苗的免疫原性具有明显的增强作用，并发现二者具有协同增强效应。为探讨协同效应的分子机制，本实验利用模式抗原卵清蛋白（OVA）的基因作为DNA疫苗，通过小鼠模型动物分析了小鼠IL-2（mIL-2）和mIL-7对OVA DNA疫苗免疫的协同增强作用，并探讨了其协同效应的分子机制。 通过RT-PCR分别扩增小鼠IL-2、IL-7和鸡OVA基因，分别构建它们各自的真核表达载体和IL-2/IL-7双基因表达载体。将各种表达载体转染HEK293T细胞，经Westernblot检测培养基中的重组蛋白，以确定构建的表达载体能否介导相应重组蛋白进行分泌表达。然后用不同组合的表达载体（即空载体、mIL-2、mIL-7、mIL-2/mIL-7、OVA、OVA+mIL-2、OVA+mIL-7和OVA+mIL-2/mIL-7）免疫小鼠。在免疫后不同时间通过ELISA方法检测小鼠血清OVA的抗体水平及IFN-γ和IL-4的表达水平。采用淋巴细胞增殖实验(MTT)检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖指数，同时采用流式细胞术(Flowcytometry)检测免疫小鼠CD4+/CD8+T淋巴细胞比值，mIL-2受体和mIL-7受体的表达水平，以及表达mIL-2受体和mIL-7受体的淋巴细胞数量。 结果显示，扩增的3种基因的序列与GenBank中的序列一致，构建的4种表达载体结构正确，并能介导其相应的基因在真核细胞中进行分泌表达。免疫结果显示，三组共免疫组小鼠血清OVA抗体(IgG1和IgG2a)水平、脾脏淋巴细胞增殖指数、IFN-γ和IL-4表达水平均显著高于OVA单免疫组，且OVA+mIL-2/mIL-7共免疫组又显著高于其它两组共免疫组，表明mIL-2和mIL-7对DNA疫苗的体液免疫和细胞免疫应答具有明显的协同增强作用。同时还证明mIL-2可明显提高CD4+/CD8+比值，而mIL-7明显降低CD4+/CD8+比值，表明mIL-2更利于刺激CD4+T细胞的增殖，而mIL-7则更利于刺激CD8+T细胞的增殖。为探讨协同增强作用的分子机制，分别检测了两种细胞因子对各自受体表达的影响，结果显示mIL-7可明显诱导淋巴细胞mIL-2受体的表达，而mIL-2可明显刺激表达mIL-7受体淋巴细胞的增殖，这可能是IL-2和IL-7对增强DNA疫苗免疫原性的协同效应的重要分子机制。 本研究不仅进一步证实了IL-2和IL-7对DNA疫苗免疫原性具有协同增强效应，同时初步分析了其协同效应的分子机制。这不仅对IL-2和IL-7作为DNA疫苗生物佐剂的进一步研究和应用提供了重要的科学实验依据，同时也为其它细胞因子复合生物佐剂的研究开辟了新的思路。