目的：黑色素瘤是一种严重威胁人类生命的肿瘤，其恶性程度高，侵袭力强，对常规化疗不敏感，易产生耐药且药物毒副作用大，导致其疗效不佳。因此，寻求有效的药物治疗成为黑色素瘤治疗领域的研究热点。自然界植物来源的提取物，由于其分布广泛，毒副作用小，价格低廉以及独特的药理作用，在抗肿瘤治疗上存在潜在的广阔前景。其中中药黄连的提取物小檗碱，经较多实验研究，证实了在多系统肿瘤如前列腺癌、膀胱癌、乳腺癌、肝癌、皮肤鳞癌等恶性肿瘤中具有一定的抗肿瘤活性。目前，小檗碱对黑色素瘤的作用研究较少，本课题前期MTT实验证实小檗碱抑制黑色素瘤A375细胞增殖，流式细胞实验显示，不同浓度小檗碱可以阻滞A375细胞于S期和G2/M期。根据前期研究及相关文献、miRNA数据库（miRBase,Targetscan human7.1等）选择miRNA-582-5P及其靶基因CDK1，miRNA-188-5P及其靶基因CDK2、CyclinD1、CyclinA为研究对象，旨在通过体外细胞实验，进一步了解其对人黑色素瘤A375细胞增殖的影响，并初步探讨小檗碱对黑色素瘤细胞周期阻滞的作用机制，为开发该药应用于临床抗黑色素瘤作用提供科学的理论基础。　　方法：　　(1)体外培养的人黑色素瘤A375细胞分为实验组和对照组，实验组经不同浓度小檗碱(20，40，60，80μmol/L)处理48h，对照组经二甲基亚砜（DMSO）处理48h。　　(2)采用qRT-PCR法检测miRNA-582-5P及其靶mRNA CDK1的含量，miRNA-188-5P及靶mRNA CDK2、CyclinD1、CyclinA的含量，研究细胞周期相关基因在mRNA水平的变化及调节其表达相关miRNA量的变化。　　(3)蛋白印迹法（Western Blot)检测细胞周期相关蛋白CDK1、CDK2、CyclinD1、CyclinA的表达，分析细胞周期相关蛋白表达量的变化。用统计软件SPSS17.0对数据进行统计分析。　　结果：　　(1)qRT-PCR检测到随着小檗碱浓度的增加，与对照组比较细胞中CDK1、CDK2、CyclinD1、CyclinA mRNA表达降低（均P<0.05）。　　(2)小檗碱在20μmol/L、40μmol/L浓度下对A375细胞miRNA-582-5P的表达无明显影响（P﹥0.05），在60μmol/L、80μmol/L时miRNA-582-5P的表达上调。随小檗碱浓度升高，与对照组比较miRNA-188-5p的表达上调（均P<0.05）。　　(3)Western Blotting法显示小檗碱可降低CDK1、CDK2、CyclinD1、CyclinA蛋白水平的表达。　　结论：小檗碱通过降低mRNA表达量与升高抑制其翻译相关的miRNA（miRNA-582-5p、miRNA-188-5p）含量共同使黑色素瘤A375细胞周期相关蛋白（CDK1、CDK2、CyclinD1、CyclinA）表达降低，进而阻滞细胞周期进程，抑制肿瘤生长。