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水稻是世界上最重要的粮食作物之一,抗病性和开花时间是水稻研究的两个热点。在本研究中,我们发现一个水稻T-DNA插入突变体(dlf1),其表型晚花,矮化。我们从该突变体中克隆到一个WRKY家族的基因WRKY11。 T-DNA插入WRKY11的启动子区域,并在该突变体中,WRKY11的表达量上调。对野生型和突变体进行稻瘟病菌接种实验发现,WRKY11的过量表达降低了突变体植株对稻瘟病菌的抗性。在长短日照下,dlf1突变体中WRKY11抑制了Ehd2及其下游基因Hd1, Hd3a, Ehdl的表达,从而影响水稻开花。1VRKY11的干涉植株在长日照下呈早花表型。WRKY11有两个转录本(OsWRKY11.1, OsWRKY11.2)。超表达WRKY11.2转录本或者其5端缺失的转录本,其转基因株系皆呈现突变体的矮化晚花表型,我们推测,WRKY11.2或者其5端缺失的蛋白起着主要负调控作用。实验数据表明,超表达WRKY11下调了Ehd2及其下游开花相关基因的表达从而影响水稻开花,并降低了植株对稻瘟病菌的抗性。水稻假病斑基因SPL11(Spotted leafll)编码一个E3连接酶,拥有U-box/ARM重复区域。SPL11负调控细胞程序性死亡,并调控水稻开花。spl11突变体增强了对稻瘟病菌和白叶枯病菌的抗性。SPIN1(for SPL11-interacting protein1)在细胞核内与SPL1l相互作用,SPIN1是一个RNA/DNA结合蛋白,有一个KH结构域。超表达SPIN1使植株在长短日照下都晚花。在本研究中,我们采用酵母双杂体系,以SPIN1全长cDNA为诱饵,筛选出SPIN1互作蛋白RBS1(RNA-binding and SPIN1-interacting1), RBS1是一个RNA结合蛋白,有三个RNA识别区域(RNA recognition motif)。RBS1与SPIN1在细胞核内互作。与SPIN1转基因株系类似,稻瘟病菌生理小种CHNOS接种RBS1超表达和干涉株系,其发病表型与野生型并无显著差异,推测RBS1并不参与植物防御反应。RBS1超表达植株在长短日照下和野生型相比晚花一周左右。荧光定量PCR检测到在RBS1超表达植株中Hd3a的表达受到抑制。RBS1的表达在SPIN1超表达植株和spl11突变体中被诱导,另一方面SPIN1mRNA在RBS1超表达植株中被诱导,而SPLll被抑制。Western blot发现SPIN1蛋白水平在RBS1超表达植株中上调,并且RBS1的蛋白水平在SPIN1超表达植株中增高。这些实验结果推测RBS1是一个新的开花抑制子,并在RBS1和SPIN1之间是正调控关系,而RBS1和SPL11是负调控关系。