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目的建立动物模型,实时荧光定量PCR、Western免疫印迹分析方法,检测P13K、AKt在正畸牙移动牙周组织改建过程中的表达及变化,探讨正畸力作用下兔牙周组织中P13K／AKt信号通路在牙周组织改建过程中的作用。方法1、建立动物模型选用24只日本大耳白兔(体重2.0±0.2kg),建立正畸牙移动的动物模型,按照3天、5天、7天、14天随机分组,每组6只。上颌右侧戴矫治器为实验组,分别在切牙与磨牙的近颈端缠绕双股结扎丝,然后在切牙与磨牙间放置镍钛螺簧,力值80g,使磨牙近中移动。上颌左侧未戴矫治器为对照组。实验动物分别于3、5、7、14天处死。2、RQ-PCR按逆转录试剂盒使用说明操作,选用oligndT作引物合成第一链cDNA,RQ-PCR检测正畸力作用下P13K、AKt在牙周组织中的表达及变化。所有的产物,在ABI Prism 7500HT序列检测系统中运行。3次独立样本经过3次独立实验后得到的数据用公式RQ=2-ΔΔCt进行分析。3、Western免疫印迹分析吸取上清,弃沉淀,考马斯亮蓝法测定样品中蛋白浓度。上清用8%SDS-PAGE分离然后转移到PVDF膜上,经2h50V的转印后TTBS洗膜5 min×3次。用含5%BSA的TTBS封闭,4℃过夜,再与抗P13K抗体,抗AKt抗体室温孵育2h,与相应的HRP标记的羊抗兔二抗(1：5000)室温孵育1h,ECL系统显影。4、统计学分析应用SPSS 12.0统计软件对戴矫治器组与未戴矫治器组进行配对t检验,P<0.05,有统计学意义。结果1、RQ-PCR与对照组比较,加力3天后牙周组织中P13K、AKt mRNA表达增加,7天明显增加,随后下降。3天、5天、7天、14天各时段与对照组比较均有统计学意义(P<0.05),其中7天差异显著(P<0.01)。2、Western免疫印迹分析与RQ-PCR结果相一致。正畸力作用下P13K、AKt在兔牙周组织中的蛋白表达增加,7天尤为显著,随后下降。3天、5天、7天、14天各时段与对照组比较均有统计学意义(P<0.05),其中7天差异显著(P<0.01)。结论1、正畸力作用下兔牙周组织中P13K、AKt的表达增加。2、P13K／AKt信号通路参与正畸牙移动过程中的牙周组织改建。