【摘 要】
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对类人胶原蛋白基因工程菌E.coli的发酵条件进行了优化研究,建立起补料分批发酵的动力学模型,并初步摸索了类人胶原蛋白的提取分离条件。 摇瓶正交实验表明,该菌株在34℃、摇
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对类人胶原蛋白基因工程菌E.coli的发酵条件进行了优化研究,建立起补料分批发酵的动力学模型,并初步摸索了类人胶原蛋白的提取分离条件。 摇瓶正交实验表明,该菌株在34℃、摇瓶转速为200r/min的条件下,最适葡萄糖浓度为10g/l,酵母粉浓度为5g/l, pH为6.8。发酵罐条件下,搅拌转速为1400r/min时菌体生长最佳:通过补料技术维持葡萄糖浓度为10g/l,重组菌培养密度OD600可达到98,类人胶原蛋白的表达量达到了菌体蛋白量的29.4%。 研究了重组类人胶原蛋白基因工程菌在分批发酵阶段和补料分批发酵阶段的生长特性,结果表明:在分批发酵过程菌体生长动力学为譬二器盖义,基质消耗动力学为—警二揣/+O.05X;在补料分批发酵阶段,利用近似指数流加培养方式进行补料,得到菌体干重为71.02g/l;归纳的模型与实际发酵过程得到的实验数据吻合良好。 将菌悬液在不同条件下进行破碎,发现用细胞破碎缓冲液超声破碎20分钟最为经济合理,类人胶原蛋白浓度达2.8g/l。超滤后截留液中类人胶原蛋白浓度为8.2g/l。经过饱和度为20%(NH4)2804的初级分离和DE52树脂吸附,取得了初步的纯化工艺条件。
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